மூலக்கூறு பரிசோதனைக்கான செய்ய வேண்டியவை மற்றும் செய்யக்கூடாதவை

மூலக்கூறு கண்டறியும் முறைகள், மாதிரிகளில் காணப்படும் மிகச்சிறிய அளவிலான நியூக்ளிக் அமிலத்தைப் பெருக்குவதன் மூலம், அதிக அளவிலான நியூக்ளிக் அமிலத்தை உருவாக்கும் திறனைக் கொண்டுள்ளன. இது நுட்பமான கண்டறிதலைச் சாத்தியமாக்குவதற்குப் பயனுள்ளதாக இருந்தாலும், ஆய்வகச் சூழலில் பெருக்கத் துகள்கள் பரவுவதன் மூலம் மாசுபடுவதற்கான சாத்தியத்தையும் இது ஏற்படுத்துகிறது. சோதனைகளை மேற்கொள்ளும்போது, ​​வினைப்பொருட்கள், ஆய்வக உபகரணங்கள் மற்றும் மேசை இடம் ஆகியவை மாசுபடுவதைத் தவிர்க்க நடவடிக்கைகள் எடுக்கப்படலாம், ஏனெனில் அத்தகைய மாசுபடுதல் தவறான நேர்மறை (அல்லது தவறான எதிர்மறை) முடிவுகளை உருவாக்கக்கூடும்.

மாசுபடுவதற்கான வாய்ப்பைக் குறைக்க, நல்ல ஆய்வக நடைமுறைகள் எல்லா நேரங்களிலும் கடைப்பிடிக்கப்பட வேண்டும். குறிப்பாக, பின்வரும் அம்சங்கள் தொடர்பாக முன்னெச்சரிக்கை நடவடிக்கைகள் எடுக்கப்பட வேண்டும்:

1. வினைப்பொருட்களைக் கையாளுதல்
2. பணிச்சூழல் மற்றும் உபகரணங்களை ஒழுங்கமைத்தல்
3. குறிப்பிட்ட மூலக்கூறு வெளிக்கான பயன்பாடு மற்றும் சுத்தம் செய்தல் குறித்த அறிவுரை
4. பொதுவான மூலக்கூறு உயிரியல் ஆலோசனை
5. உள் கட்டுப்பாடுகள்
6. நூல் விவரப் பட்டியல்

1. வினைப்பொருட்களைக் கையாளுதல்

ஏரோசோல்கள் உருவாவதைத் தவிர்க்க, வினைபடு பொருள் குழாய்களைத் திறப்பதற்கு முன் சுருக்கமாக மையவிலக்கு செய்யவும். பலமுறை உறையவைத்து-உருகுவதைத் தவிர்க்கவும், முதன்மை இருப்புகள் மாசுபடுவதைத் தவிர்க்கவும் வினைபடு பொருள்களைச் சிறு பகுதிகளாகப் பிரிக்கவும். அனைத்து வினைபடு பொருள் மற்றும் வினைக்குழாய்களிலும் தெளிவாகப் பெயரிட்டுத் தேதியிடவும், மேலும் அனைத்து சோதனைகளிலும் பயன்படுத்தப்பட்ட வினைபடு பொருள் தொகுதி மற்றும் தொகுதி எண்களின் பதிவேடுகளைப் பராமரிக்கவும். வடிகட்டி முனைகளைப் பயன்படுத்தி அனைத்து வினைபடு பொருள்கள் மற்றும் மாதிரிகளைப் பிப்பெட் செய்யவும். வாங்குவதற்கு முன், பயன்படுத்தப்படவுள்ள பிப்பெட்டின் பிராண்டிற்கு வடிகட்டி முனைகள் பொருந்துகின்றனவா என்பதை உற்பத்தியாளரிடம் உறுதிப்படுத்திக் கொள்வது நல்லது.

2. பணிச்சூழல் மற்றும் உபகரணங்களை ஒழுங்கமைத்தல்

சுத்தமான பகுதிகளில் (PCR-க்கு முன்) இருந்து அசுத்தமான பகுதிகளுக்கு (PCR-க்கு பின்) என, வேலை ஓட்டம் ஒரே திசையில் நடைபெறுவதை உறுதிசெய்யும் வகையில் பணியிடம் ஒழுங்கமைக்கப்பட வேண்டும். பின்வரும் பொதுவான முன்னெச்சரிக்கைகள் மாசுபடுவதற்கான வாய்ப்பைக் குறைக்க உதவும். மாஸ்டர்மிக்ஸ் தயாரிப்பு, நியூக்ளிக் அமிலப் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட் சேர்த்தல், பெருக்கம் மற்றும் பெருக்கப்பட்ட தயாரிப்பைக் கையாளுதல், மற்றும் தயாரிப்புப் பகுப்பாய்வு (எ.கா. ஜெல் எலக்ட்ரோஃபோரெசிஸ்) ஆகியவற்றுக்காகத் தனித்தனியான பிரத்யேக அறைகளை அல்லது குறைந்தபட்சம் உடல்ரீதியாகப் பிரிக்கப்பட்ட பகுதிகளைக் கொண்டிருக்க வேண்டும்.

சில சூழல்களில், 4 தனித்தனி அறைகளைக் கொண்டிருப்பது கடினம். சாத்தியமான ஆனால் அவ்வளவு விரும்பத்தக்கதல்லாத ஒரு வழி, மாஸ்டர்மிக்ஸ் தயாரிப்பை ஒரு கட்டுப்பாட்டுப் பகுதியில், உதாரணமாக ஒரு லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்டில் செய்வது. நெஸ்டட் பிசிஆர் பெருக்கத்தைப் பொறுத்தவரை, இரண்டாம் சுற்று வினைக்கான மாஸ்டர்மிக்ஸ் தயாரிப்பு, மாஸ்டர்மிக்ஸ் தயாரிப்பிற்கான 'தூய்மையான' பகுதியில் செய்யப்பட வேண்டும், ஆனால் முதன்மை பிசிஆர் தயாரிப்புடன் தடுப்பூசி இடுதல் பெருக்க அறையிலும், முடிந்தால் ஒரு பிரத்யேக கட்டுப்பாட்டுப் பகுதியிலும் (உதாரணமாக ஒரு லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்) செய்யப்பட வேண்டும்.

ஒவ்வொரு அறைக்கும்/பகுதிக்கும், தெளிவாகப் பெயரிடப்பட்ட பிப்பெட்டுகள், வடிகட்டி முனைகள், குழாய் அடுக்குகள், வோர்டெக்ஸ்கள், மையவிலக்குகள் (தேவைப்பட்டால்), பேனாக்கள், பொதுவான ஆய்வக வினைப்பொருட்கள், ஆய்வக மேலங்கிகள் மற்றும் கையுறைப் பெட்டிகள் அடங்கிய தனித்தனித் தொகுப்பு தேவைப்படும். இவை அந்தந்தப் பணிநிலையங்களிலேயே இருக்க வேண்டும். குறிப்பிட்ட பகுதிகளுக்கு இடையில் செல்லும்போது கைகளைக் கழுவ வேண்டும், மேலும் கையுறைகளையும் ஆய்வக மேலங்கிகளையும் மாற்ற வேண்டும். வினைப்பொருட்களையும் உபகரணங்களையும் அழுக்கான பகுதியிலிருந்து சுத்தமான பகுதிக்கு நகர்த்தக் கூடாது. ஒரு வினைப்பொருளையோ அல்லது உபகரணத்தையோ பின்னோக்கி நகர்த்த வேண்டிய ஒரு தீவிரமான சூழல் ஏற்பட்டால், அது முதலில் 10% சோடியம் ஹைப்போகுளோரைட் கொண்டு கிருமி நீக்கம் செய்யப்பட்டு, பின்னர் கிருமியழிக்கப்பட்ட நீரால் துடைக்கப்பட வேண்டும்.

குறிப்பு

10% சோடியம் ஹைப்போகுளோரைட் கரைசலை தினமும் புதிதாகத் தயாரிக்க வேண்டும். கிருமி நீக்கம் செய்யப் பயன்படுத்தும்போது, ​​குறைந்தபட்சம் 10 நிமிடங்கள் தொடர்பு நேரம் கடைப்பிடிக்கப்பட வேண்டும்.
மாற்றாக, உள்ளூர் பாதுகாப்புப் பரிந்துரைகள் சோடியம் ஹைப்போகுளோரைட்டின் பயன்பாட்டை அனுமதிக்காத பட்சத்தில் அல்லது உபகரணங்களின் உலோகப் பாகங்களைத் தூய்மைப்படுத்த சோடியம் ஹைப்போகுளோரைட் பொருத்தமற்றதாக இருக்கும் பட்சத்தில், டிஎன்ஏ-வை அழிக்கும் மேற்பரப்புத் தூய்மைப்படுத்திகளாகச் சரிபார்க்கப்பட்ட, வணிகரீதியாகக் கிடைக்கும் தயாரிப்புகளைப் பயன்படுத்தலாம்.

சிறந்தபட்சமாக, பணியாளர்கள் ஒருவழிப் பணி ஓட்ட நெறிமுறையைப் பின்பற்ற வேண்டும்; மேலும், ஒரே நாளில் அசுத்தமான (PCR-க்குப் பிந்தைய) பகுதிகளிலிருந்து சுத்தமான (PCR-க்கு முந்தைய) பகுதிகளுக்கு மீண்டும் செல்லக்கூடாது. இருப்பினும், சில சமயங்களில் இது தவிர்க்க முடியாததாகலாம். அத்தகைய சந்தர்ப்பம் ஏற்படும்போது, ​​பணியாளர்கள் தங்கள் கைகளை நன்கு கழுவுதல், கையுறைகளை மாற்றுதல், அதற்கென ஒதுக்கப்பட்ட ஆய்வக அங்கியைப் பயன்படுத்துதல் மற்றும் ஆய்வகப் புத்தகங்கள் போன்ற, மீண்டும் அறைக்கு வெளியே எடுத்துச் செல்ல விரும்பும் எந்தவொரு உபகரணத்தையும் உள்ளே கொண்டு வராமல் இருத்தல் ஆகியவற்றில் கவனமாக இருக்க வேண்டும். மூலக்கூறு முறைகள் குறித்த பணியாளர் பயிற்சியில் இத்தகைய கட்டுப்பாட்டு நடவடிக்கைகள் வலியுறுத்தப்பட வேண்டும்.

பயன்பாட்டிற்குப் பிறகு, மேசைப் பகுதிகளை 10% சோடியம் ஹைப்போகுளோரைட் (மீதமுள்ள ப்ளீச்சை அகற்ற கிருமியழிக்கப்பட்ட நீரால் கழுவவும்), 70% எத்தனால், அல்லது வணிக ரீதியாகக் கிடைக்கும், டிஎன்ஏ-வை அழிக்கும் அங்கீகரிக்கப்பட்ட கிருமிநீக்கி ஆகியவற்றைக் கொண்டு சுத்தம் செய்ய வேண்டும். கதிர்வீச்சு மூலம் கிருமிநீக்கம் செய்ய, புற ஊதா (UV) விளக்குகள் பொருத்தப்படுவது சிறந்தது. இருப்பினும், ஆய்வகப் பணியாளர்களின் புற ஊதா கதிர்வீச்சு வெளிப்பாட்டைக் கட்டுப்படுத்த, புற ஊதா விளக்குகளின் பயன்பாடு பாதுகாப்பு அறைகள் போன்ற மூடிய வேலை செய்யும் பகுதிகளுக்குள் மட்டுமே கட்டுப்படுத்தப்பட வேண்டும். விளக்குகள் திறம்பட செயல்படுவதை உறுதிசெய்ய, புற ஊதா விளக்கு பராமரிப்பு, காற்றோட்டம் மற்றும் சுத்தம் செய்தல் தொடர்பான உற்பத்தியாளரின் அறிவுறுத்தல்களைப் பின்பற்றவும்.

சோடியம் ஹைப்போகுளோரைட்டுக்குப் பதிலாக 70% எத்தனாலைப் பயன்படுத்தினால், கிருமி நீக்கத்தை முழுமையாக்க புற ஊதா ஒளிக்கதிர் வீச்சு தேவைப்படும்.
வோர்டெக்ஸ் மற்றும் சென்ட்ரிஃபியூஜை சோடியம் ஹைப்போகுளோரைட் கொண்டு சுத்தம் செய்ய வேண்டாம்; அதற்குப் பதிலாக, 70% எத்தனால் கொண்டு துடைத்து, புற ஊதா ஒளிக்கு உட்படுத்தவும், அல்லது வணிக ரீதியான டிஎன்ஏ-அழிக்கும் கிருமிநீக்கியைப் பயன்படுத்தவும். சிதறல்களுக்கு, மேலதிக சுத்தம் செய்யும் ஆலோசனைகளுக்கு உற்பத்தியாளரை அணுகவும். உற்பத்தியாளரின் அறிவுறுத்தல்கள் அனுமதித்தால், பிப்பெட்டுகளை ஆட்டோகிளேவ் மூலம் வழக்கமாக கிருமிநீக்கம் செய்ய வேண்டும். பிப்பெட்டுகளை ஆட்டோகிளேவ் செய்ய முடியாவிட்டால், அவற்றை 10% சோடியம் ஹைப்போகுளோரைட் கொண்டு சுத்தம் செய்து (அதன்பின் கிருமிநீக்கப்பட்ட நீரால் நன்கு துடைக்கவும்) அல்லது வணிக ரீதியான டிஎன்ஏ-அழிக்கும் கிருமிநீக்கியைக் கொண்டு சுத்தம் செய்து, அதன்பின் புற ஊதா ஒளிக்கு உட்படுத்துவது போதுமானது.

அதிக செறிவுள்ள சோடியம் ஹைப்போகுளோரைட்டைக் கொண்டு தொடர்ந்து சுத்தம் செய்தால், அது காலப்போக்கில் பைப்பெட் பிளாஸ்டிக்குகள் மற்றும் உலோகங்களைச் சேதப்படுத்தக்கூடும்; முதலில் உற்பத்தியாளரின் பரிந்துரைகளைச் சரிபார்க்கவும். அனைத்து உபகரணங்களும் உற்பத்தியாளர் பரிந்துரைத்த அட்டவணைப்படி தவறாமல் அளவுத்திருத்தம் செய்யப்பட வேண்டும். அளவுத்திருத்த அட்டவணை பின்பற்றப்படுவதையும், விரிவான பதிவேடுகள் பராமரிக்கப்படுவதையும், மற்றும் உபகரணங்களில் சேவை லேபிள்கள் தெளிவாகக் காட்டப்படுவதையும் உறுதிசெய்யும் பொறுப்பில் ஒரு நியமிக்கப்பட்ட நபர் இருக்க வேண்டும்.

3. குறிப்பிட்ட மூலக்கூறு வெளிக்கான பயன்பாடு மற்றும் சுத்தம் செய்தல் குறித்த அறிவுரை

PCR-க்கு முந்தைய நிலை: வினைப்பொருள் பிரித்தல் / மாஸ்டர்மிக்ஸ் தயாரித்தல்: மூலக்கூறு சோதனைகளைத் தயாரிப்பதற்குப் பயன்படுத்தப்படும் அனைத்து இடங்களிலும் இதுவே மிகவும் சுத்தமானதாக இருக்க வேண்டும். மேலும், இது புற ஊதா (UV) ஒளி பொருத்தப்பட்ட, பிரத்யேகமாக ஒதுக்கப்பட்ட லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்டாக இருப்பது சிறந்தது. மாதிரிகள், பிரித்தெடுக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலம் மற்றும் பெருக்கப்பட்ட PCR விளைபொருட்கள் ஆகியவற்றை இந்த இடத்தில் கையாளக் கூடாது. பெருக்க வினைப்பொருட்களை அதே பிரத்யேக இடத்தில், குறிப்பாக லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட் அல்லது PCR-க்கு முந்தைய பகுதிக்கு அருகில், ஒரு உறைவிப்பானில் (அல்லது உற்பத்தியாளரின் பரிந்துரைகளின்படி குளிர்சாதனப் பெட்டியில்) வைக்க வேண்டும். PCR-க்கு முந்தைய பகுதி அல்லது லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்டிற்குள் நுழையும் ஒவ்வொரு முறையும் கையுறைகளை மாற்ற வேண்டும்.

பிசிஆர்-க்கு முந்தைய பகுதி அல்லது லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்டைப் பயன்படுத்துவதற்கு முன்னும் பின்னும் பின்வருமாறு சுத்தம் செய்ய வேண்டும்: கேபினட்டில் உள்ள பிப்பெட்டுகள், டிப் பாக்ஸ்கள், வோர்டெக்ஸ், சென்ட்ரிஃபியூஜ், ட்யூப் ரேக்குகள், பேனாக்கள் போன்ற அனைத்துப் பொருட்களையும் 70% எத்தனால் அல்லது வணிக ரீதியான டிஎன்ஏ-வை அழிக்கும் கிருமிநாசினியைக் கொண்டு துடைத்து உலர விடவும். லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட் போன்ற மூடிய வேலை செய்யும் பகுதியாக இருந்தால், அதன் ஹூடை 30 நிமிடங்களுக்குப் புற ஊதாக் கதிர்களுக்கு (UV light) வெளிப்படுத்தவும்.

குறிப்பு

வினைப்பொருட்களைப் புற ஊதாக் கதிர்களுக்கு வெளிப்படுத்த வேண்டாம்; கேபினட் சுத்தமான பிறகு மட்டுமே அவற்றை அதனுள் வைக்கவும். ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் பிசிஆர் (reverse transcription PCR) செய்யும்போது, ​​RNase-களைத் தொட்டவுடன் சிதைக்கும் ஒரு கரைசலைக் கொண்டு மேற்பரப்புகளையும் உபகரணங்களையும் துடைப்பது உதவியாக இருக்கும். இது, ஆர்.என்.ஏ-வின் நொதிச் சிதைவினால் ஏற்படும் தவறான எதிர்மறை முடிவுகளைத் தவிர்க்க உதவும். கிருமி நீக்கம் செய்த பிறகு மற்றும் மாஸ்டர்மிக்ஸைத் தயாரிப்பதற்கு முன்பு, கையுறைகளை மீண்டும் ஒருமுறை மாற்ற வேண்டும், அதன் பிறகு கேபினட் பயன்படுத்தத் தயாராக இருக்கும்.

பிசிஆர்-க்கு முன்: நியூக்ளிக் அமிலத்தைப் பிரித்தெடுத்தல்/வார்ப்புருவைச் சேர்த்தல்:

நியூக்ளிக் அமிலத்தை, தனியாக நியமிக்கப்பட்ட இரண்டாவது பகுதியில், தனியான பிப்பெட்டுகள், வடிகட்டி முனைகள், குழாய் அடுக்குகள், புதிய கையுறைகள், ஆய்வக மேலங்கிகள் மற்றும் பிற உபகரணங்களைப் பயன்படுத்திப் பிரித்தெடுத்துக் கையாள வேண்டும். இந்தப் பகுதி, மாஸ்டர்மிக்ஸ் குழாய்கள் அல்லது தட்டுகளில் டெம்ப்ளேட், கட்டுப்பாடுகள் மற்றும் போக்குக்கோடுகளைச் சேர்ப்பதற்கும் உரியது. பகுப்பாய்வு செய்யப்படும் பிரித்தெடுக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமில மாதிரிகள் மாசுபடுவதைத் தவிர்க்க, நேர்மறைக் கட்டுப்பாடுகள் அல்லது தரநிலைகளைக் கையாளுவதற்கு முன்பு கையுறைகளை மாற்றுவதும், தனியான பிப்பெட்டுகளைப் பயன்படுத்துவதும் பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. பிசிஆர் வினைப்பொருட்கள் மற்றும் பெருக்கப்பட்ட விளைபொருட்களை இந்தப் பகுதியில் பிப்பெட் மூலம் எடுக்கக் கூடாது. மாதிரிகள் அதே பகுதியில் உள்ள நியமிக்கப்பட்ட குளிர்சாதனப் பெட்டிகள் அல்லது உறைவிப்பான்களில் சேமிக்கப்பட வேண்டும். மாதிரிப் பணித்தளமும் மாஸ்டர்மிக்ஸ் இடத்தைப் போலவே சுத்தம் செய்யப்பட வேண்டும்.

பிசிஆர்-க்குப் பின்: பெருக்கம் மற்றும் பெருக்கப்பட்ட விளைபொருளைக் கையாளுதல்

இந்த ஒதுக்கப்பட்ட இடம், பெருக்கத்திற்குப் பிந்தைய செயல்முறைகளுக்கானது மற்றும் இது PCR-க்கு முந்தைய பகுதிகளிலிருந்து உடல்ரீதியாகப் பிரிக்கப்பட்டிருக்க வேண்டும். இதில் பொதுவாக தெர்மோசைக்ளர்கள் மற்றும் நிகழ்நேர தளங்கள் இருக்கும். மேலும், நெஸ்டட் PCR செய்யப்படும் பட்சத்தில், முதல் சுற்று PCR விளைபொருளை இரண்டாம் சுற்று வினையில் சேர்ப்பதற்காக, ஒரு லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட் இருப்பது சிறந்தது. மாசுபடுவதற்கான அபாயம் அதிகமாக இருப்பதால், PCR வினைப்பொருட்கள் மற்றும் பிரித்தெடுக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலத்தை இந்தப் பகுதியில் கையாளக்கூடாது. இந்தப் பகுதியில் கையுறைகள், ஆய்வக மேலங்கிகள், தட்டு மற்றும் குழாய் அடுக்குகள், பிப்பெட்டுகள், வடிகட்டி முனைகள், கொள்கலன்கள் மற்றும் பிற உபகரணங்கள் தனித்தனியாக இருக்க வேண்டும். குழாய்களைத் திறப்பதற்கு முன் மையவிலக்கு செய்ய வேண்டும். மாதிரிப் பணித்தளமும் மாஸ்டர்மிக்ஸ் இடத்தைப் போலவே சுத்தம் செய்யப்பட வேண்டும்.

பிசிஆர்-க்குப் பிறகு: தயாரிப்பு பகுப்பாய்வு

இந்த அறை, ஜெல் எலக்ட்ரோஃபோரெசிஸ் தொட்டிகள், பவர் பேக்குகள், UV டிரான்ஸ்இல்லுமினேட்டர் மற்றும் ஜெல் ஆவணப்படுத்தும் அமைப்பு போன்ற தயாரிப்பு கண்டறியும் உபகரணங்களுக்கானது. இந்தப் பகுதியில் கையுறைகள், ஆய்வக மேலங்கிகள், தட்டு மற்றும் குழாய் அடுக்குகள், பிப்பெட்டுகள், வடிகட்டி முனைகள், கொள்கலன்கள் மற்றும் பிற உபகரணங்களின் தனித்தனி தொகுப்புகள் இருக்க வேண்டும். லோடிங் டை, மாலிகுலர் மார்க்கர், அகரோஸ் ஜெல் மற்றும் பஃபர் கூறுகளைத் தவிர வேறு எந்த வினைப்பொருட்களையும் இந்தப் பகுதிக்குள் கொண்டு வரக்கூடாது. மாஸ்டர்மிக்ஸ் இடத்தை சுத்தம் செய்வது போலவே மாதிரி வேலை செய்யும் இடமும் சுத்தம் செய்யப்பட வேண்டும்.

முக்கிய குறிப்பு

பிசிஆர்-க்கு பிந்தைய அறைகளில் ஏற்கனவே பணிகள் மேற்கொள்ளப்பட்டிருந்தால், அதே நாளில் பிசிஆர்-க்கு முந்தைய அறைகளுக்குள் நுழைவதைத் தவிர்ப்பது சிறந்தது. இது முற்றிலும் தவிர்க்க முடியாத பட்சத்தில், முதலில் கைகளை நன்கு கழுவுவதையும், அறைகளுக்குள் குறிப்பிட்ட ஆய்வக மேலங்கிகளை அணிவதையும் உறுதிப்படுத்திக் கொள்ளுங்கள். பிசிஆர்-க்கு பிந்தைய அறைகளில் பயன்படுத்தப்பட்ட ஆய்வகப் புத்தகங்கள் மற்றும் ஆவணங்களை பிசிஆர்-க்கு முந்தைய அறைகளுக்குள் எடுத்துச் செல்லக்கூடாது; தேவைப்பட்டால், நெறிமுறைகள்/மாதிரி அடையாள எண்கள் போன்றவற்றின் நகல் பிரதிகளை எடுத்துக்கொள்ளுங்கள்.

4. பொதுவான மூலக்கூறு உயிரியல் ஆலோசனை

பரிசோதனைத் தடையைத் தவிர்க்க, தூள் இல்லாத கையுறைகளைப் பயன்படுத்தவும். மாசுபாட்டைக் குறைக்க, சரியான பிப்பெட்டிங் நுட்பம் மிகவும் முக்கியமானது. தவறான பிப்பெட்டிங் முறையானது, திரவங்களை வெளியேற்றும் போது தெறிப்பதற்கும், ஏரோசோல்கள் உருவாவதற்கும் வழிவகுக்கும். சரியான பிப்பெட்டிங்கிற்கான நல்ல நடைமுறைகளைப் பின்வரும் இணைப்புகளில் காணலாம்: கில்சன் பிப்பெட்டிங் வழிகாட்டி, அனாகெம் பிப்பெட்டிங் நுட்பக் காணொளிகள். குழாய்களைத் திறப்பதற்கு முன் அவற்றை மையவிலக்கு செய்யவும், மேலும் தெறிப்பதைத் தவிர்க்க அவற்றை கவனமாகத் திறக்கவும். அசுத்தங்கள் உள்ளே செல்வதைத் தவிர்க்க, பயன்படுத்திய உடனேயே குழாய்களை மூடவும்.

பல வினைகளை நிகழ்த்தும்போது, ​​வினைப்பொருட்களை மாற்றும் எண்ணிக்கையைக் குறைக்கவும், மாசுபடுவதற்கான அபாயத்தைக் குறைக்கவும், பொதுவான வினைப்பொருட்களை (எ.கா. நீர், dNTPகள், தாங்கல் கரைசல், பிரைமர்கள் மற்றும் நொதி) கொண்ட ஒரே மாஸ்டர்மிக்ஸைத் தயாரிக்கவும். மாஸ்டர்மிக்ஸை பனிக்கட்டி அல்லது குளிர்ச்சியான கட்டியின் மீது அமைப்பது பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. ஹாட் ஸ்டார்ட் நொதியைப் பயன்படுத்துவது, குறிப்பிட்ட தன்மையற்ற விளைபொருட்களின் உற்பத்தியைக் குறைக்க உதவக்கூடும். சிதைவைத் தவிர்ப்பதற்காக, ஒளிரும் ஆய்வுக்கருவிகளைக் கொண்ட வினைப்பொருட்களை ஒளியிலிருந்து பாதுகாக்கவும்.

5. உள் கட்டுப்பாடுகள்

அனைத்து வினைகளிலும், நன்கு வரையறுக்கப்பட்ட, உறுதிசெய்யப்பட்ட நேர்மறை மற்றும் எதிர்மறை கட்டுப்பாடுகளுடன், வார்ப்புரு இல்லாத ஒரு கட்டுப்பாட்டையும், அளவுசார் வினைகளுக்கு பல-புள்ளி டைட்ரேட் செய்யப்பட்ட போக்குக்கோட்டையும் சேர்க்கவும். நேர்மறை கட்டுப்பாடு, மாசுபடும் அபாயத்தை ஏற்படுத்தும் அளவுக்கு மிகவும் வலுவாக இருக்கக்கூடாது. நியூக்ளிக் அமிலத்தைப் பிரித்தெடுக்கும்போது, ​​நேர்மறை மற்றும் எதிர்மறை பிரித்தெடுப்புக் கட்டுப்பாடுகளைச் சேர்க்கவும்.

பயனர்கள் நடத்தை விதிகளை அறிந்து கொள்ளும் வகையில், ஒவ்வொரு பகுதியிலும் தெளிவான அறிவுறுத்தல்களைப் பதிவிடுமாறு பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. மருத்துவ மாதிரிகளில் மிகக் குறைந்த அளவிலான டிஎன்ஏ அல்லது ஆர்என்ஏ-வைக் கண்டறியும் நோயறிதல் ஆய்வகங்கள், பிசிஆர்-க்கு முந்தைய அறைகளில் சற்றே நேர்மறை காற்று அழுத்தத்தையும், பிசிஆர்-க்கு பிந்தைய அறைகளில் சற்றே எதிர்மறை காற்று அழுத்தத்தையும் கொண்ட தனித்தனி காற்று கையாளும் அமைப்புகளைக் கொண்டிருக்கும் கூடுதல் பாதுகாப்பு நடவடிக்கையை மேற்கொள்ள விரும்பலாம்.

இறுதியாக, ஒரு தர உறுதி (QA) திட்டத்தை உருவாக்குவது பயனுள்ளதாக இருக்கும். அத்தகைய திட்டத்தில், வினைப்பொருள் முதன்மை இருப்புகள் மற்றும் செயல்பாட்டு இருப்புகளின் பட்டியல்கள், சோதனைக் கருவிகள் மற்றும் வினைப்பொருட்களைச் சேமிப்பதற்கான விதிகள், கட்டுப்பாட்டு முடிவுகளை அறிக்கையிடுதல், பணியாளர் பயிற்சித் திட்டங்கள், பழுது நீக்கும் வழிமுறைகள் மற்றும் தேவைப்படும்போது எடுக்க வேண்டிய சரிசெய்யும் நடவடிக்கைகள் ஆகியவை அடங்கியிருக்க வேண்டும்.

6. நூல் விவரப் பட்டியல்

அஸ்லான் ஏ, கின்செல்மன் ஜே, ட்ரீலின் ஈ, அனன்யேவா டி, லாவண்டர் ஜே. அத்தியாயம் 3: ஒரு qPCR ஆய்வகத்தை அமைத்தல். USEPA qPCR முறை 1611-ஐப் பயன்படுத்தி பொழுதுபோக்கு நீர்நிலைகளைச் சோதிப்பதற்கான ஒரு வழிகாட்டு ஆவணம். லான்சிங்-மிச்சிகன் மாநிலப் பல்கலைக்கழகம்.

பப்ளிக் ஹெல்த் இங்கிலாந்து, NHS. நுண்ணுயிரியல் ஆய்வுகளுக்கான UK தரநிலைகள்: மூலக்கூறு பெருக்கச் சோதனைகளைச் செய்யும்போது நல்ல ஆய்வக நடைமுறை). தர வழிகாட்டுதல். 2013;4(4):1–15.

மிஃப்ளின் டி. ஒரு பிசிஆர் ஆய்வகத்தை அமைத்தல். கோல்ட் ஸ்பிரிங் ஹார்ப் புரோட்டோகால். 2007;7.

ஷ்ரோடர் எஸ் 2013. மையவிலக்கு இயந்திரங்களின் வழக்கமான பராமரிப்பு: மையவிலக்கு இயந்திரங்கள், சுழலிகள் மற்றும் அடாப்டர்களைச் சுத்தம் செய்தல், பராமரித்தல் மற்றும் கிருமி நீக்கம் செய்தல் (வெள்ளை அறிக்கை எண். 14). ஹாம்பர்க்: எப்பென்டார்ஃப்; 2013.

வியானா ஆர்.வி., வாலிஸ் சி.எல். நோயறிதல் ஆய்வகங்களில் பயன்படுத்தப்படும் மூலக்கூறு அடிப்படையிலான சோதனைகளுக்கான நல்ல மருத்துவ ஆய்வக நடைமுறை (GCLP), இதில்: அகியார் ஐ, பதிப்பாசிரியர். தரக் கட்டுப்பாட்டின் பரந்த நிறமாலைகள். ரிஜெகா, குரோஷியா: இன்டெக்; 2011: 29–52.