អ្វីដែលត្រូវធ្វើ និងអ្វីដែលមិនគួរធ្វើសម្រាប់ការធ្វើតេស្តម៉ូលេគុល

វិធីសាស្ត្ររកឃើញម៉ូលេគុលមានសមត្ថភាពផលិតអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកក្នុងបរិមាណច្រើនតាមរយៈការបង្កើនបរិមាណដានដែលមាននៅក្នុងគំរូ។ ខណៈពេលដែលវាមានប្រយោជន៍សម្រាប់ការអនុញ្ញាតឱ្យមានការរកឃើញដែលងាយប្រតិកម្ម វាក៏បង្កើតលទ្ធភាពនៃការចម្លងរោគតាមរយៈការរីករាលដាលនៃអេរ៉ូសូលពង្រីកនៅក្នុងបរិយាកាសមន្ទីរពិសោធន៍។ នៅពេលធ្វើការពិសោធន៍ វិធានការអាចត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីជៀសវាងការចម្លងរោគនៃសារធាតុប្រតិកម្ម ឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ និងកន្លែងអង្គុយ ព្រោះការចម្លងរោគបែបនេះអាចបង្កើតលទ្ធផលវិជ្ជមានមិនពិត (ឬអវិជ្ជមានមិនពិត)។

ដើម្បីជួយកាត់បន្ថយលទ្ធភាពនៃការចម្លងរោគ ការអនុវត្តល្អក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍គួរតែត្រូវបានអនុវត្តគ្រប់ពេលវេលា។ ជាពិសេស ការប្រុងប្រយ័ត្នគួរតែត្រូវបានអនុវត្តទាក់ទងនឹងចំណុចដូចខាងក្រោម៖

១. ការគ្រប់គ្រងសារធាតុប្រតិកម្ម
២. ការរៀបចំកន្លែងធ្វើការ និងឧបករណ៍
៣. ដំបូន្មានអំពីការប្រើប្រាស់ និងការសម្អាតសម្រាប់លំហម៉ូលេគុលដែលបានកំណត់
៤. ដំបូន្មានទូទៅអំពីជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល
៥. ការគ្រប់គ្រងផ្ទៃក្នុង
៦. គន្ថនិទ្ទេស

១. ការគ្រប់គ្រងសារធាតុប្រតិកម្ម

សូមបង្វិលបំពង់សារធាតុប្រតិកម្មមួយភ្លែតមុនពេលបើក ដើម្បីជៀសវាងការបង្កើតអេរ៉ូសូល។ ចែកចាយសារធាតុប្រតិកម្មដើម្បីជៀសវាងការកក-រលាយច្រើនដង និងការបំពុលស្តុកមេ។ ដាក់ស្លាក និងកាលបរិច្ឆេទឱ្យច្បាស់លាស់នូវសារធាតុប្រតិកម្ម និងបំពង់ប្រតិកម្មទាំងអស់ ព្រមទាំងរក្សាកំណត់ហេតុនៃលេខឡូត៍ និងលេខបាច់សារធាតុប្រតិកម្មដែលប្រើក្នុងការពិសោធន៍ទាំងអស់។ ចាក់សារធាតុប្រតិកម្ម និងគំរូទាំងអស់ដោយប្រើចុងតម្រង។ មុនពេលទិញ វាជាការប្រសើរក្នុងការបញ្ជាក់ជាមួយអ្នកផលិតថាចុងតម្រងសមនឹងម៉ាកបំពង់ដែលត្រូវប្រើ។

២. ការរៀបចំកន្លែងធ្វើការ និងឧបករណ៍

កន្លែងធ្វើការគួរតែត្រូវបានរៀបចំឡើង ដើម្បីធានាថាលំហូរការងារកើតឡើងក្នុងទិសដៅមួយ ពីតំបន់ស្អាត (មុន PCR) ទៅតំបន់កខ្វក់ (ក្រោយ PCR)។ ការប្រុងប្រយ័ត្នទូទៅខាងក្រោមនឹងជួយកាត់បន្ថយឱកាសនៃការចម្លងរោគ។ មានបន្ទប់ដែលបានកំណត់ដាច់ដោយឡែក ឬយ៉ាងហោចណាស់តំបន់ដាច់ដោយឡែកពីគ្នាសម្រាប់៖ ការរៀបចំមេលាយ ការស្រង់ចេញអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក និងការបន្ថែមគំរូ DNA ការពង្រីក និងការគ្រប់គ្រងផលិតផលពង្រីក និងការវិភាគផលិតផល ឧ. អេឡិចត្រូផូរីស៊ីសជែល។

នៅក្នុងបរិបទខ្លះ ការមានបន្ទប់ដាច់ដោយឡែកចំនួន ៤ គឺជារឿងពិបាក។ ជម្រើសដែលអាចធ្វើទៅបាន ប៉ុន្តែមិនសូវគួរឱ្យចង់បាន គឺត្រូវធ្វើការរៀបចំមេស្ទីកនៅក្នុងតំបន់ទប់ស្កាត់ ឧទាហរណ៍ ទូលំហូរឡាមីណា។ ក្នុងករណីនៃការពង្រីក PCR ដែលដាក់បញ្ចូលគ្នា ការរៀបចំមេស្ទីកសម្រាប់ប្រតិកម្មជុំទីពីរគួរតែត្រូវបានរៀបចំនៅក្នុងតំបន់ 'ស្អាត' សម្រាប់ការរៀបចំមេស្ទីក ប៉ុន្តែការចាក់វ៉ាក់សាំងជាមួយផលិតផល PCR បឋមគួរតែត្រូវបានធ្វើនៅក្នុងបន្ទប់ទប់ស្កាត់ ហើយប្រសិនបើអាចធ្វើទៅបាននៅក្នុងតំបន់ទប់ស្កាត់ដែលបានកំណត់ (ឧទាហរណ៍ ទូលំហូរឡាមីណា)។

បន្ទប់/តំបន់នីមួយៗត្រូវការសំណុំដាច់ដោយឡែកមួយនៃបំពង់បឺតដែលមានស្លាកសញ្ញាច្បាស់លាស់ ចុងតម្រង ធ្នើរបំពង់ vortex ម៉ាស៊ីន centrifuges (ប្រសិនបើពាក់ព័ន្ធ) ប៊ិច សារធាតុប្រតិកម្មមន្ទីរពិសោធន៍ទូទៅ អាវមន្ទីរពិសោធន៍ និងប្រអប់ស្រោមដៃ ដែលនឹងនៅតែមាននៅកន្លែងធ្វើការរៀងៗខ្លួន។ ដៃត្រូវតែលាងសម្អាត ហើយស្រោមដៃ និងអាវមន្ទីរពិសោធន៍ត្រូវផ្លាស់ប្តូរនៅពេលផ្លាស់ទីរវាងតំបន់ដែលបានកំណត់។ សារធាតុប្រតិកម្ម និងឧបករណ៍មិនគួរត្រូវបានផ្លាស់ទីពីតំបន់កខ្វក់ទៅតំបន់ស្អាតនោះទេ។ ប្រសិនបើមានករណីធ្ងន់ធ្ងរកើតឡើងដែលសារធាតុប្រតិកម្ម ឬឧបករណ៍ត្រូវផ្លាស់ទីថយក្រោយ វាត្រូវតែត្រូវបានសម្លាប់មេរោគជាមុនសិនជាមួយសូដ្យូមអ៊ីប៉ូក្លរីត 10% បន្ទាប់មកជូតចេញជាមួយទឹកស្អាត។

កំណត់ចំណាំ

ដំណោះស្រាយសូដ្យូមអ៊ីប៉ូក្លរីត ១០% ត្រូវតែផលិតថ្មីៗជារៀងរាល់ថ្ងៃ។ នៅពេលប្រើសម្រាប់ការបន្សាបជាតិពុល គួរតែប្រកាន់ខ្ជាប់នូវពេលវេលាប៉ះពាល់យ៉ាងតិច ១០ នាទី។
ម៉្យាងវិញទៀត ផលិតផលដែលមានលក់នៅលើទីផ្សារ ដែលត្រូវបានផ្ទៀងផ្ទាត់ថាជាសារធាតុបន្សាបជាតិពុលលើផ្ទៃដែលបំផ្លាញ DNA អាចត្រូវបានប្រើ ប្រសិនបើអនុសាសន៍សុវត្ថិភាពក្នុងស្រុកមិនអនុញ្ញាតឱ្យប្រើប្រាស់សូដ្យូមហ៊ីប៉ូក្លរីត ឬប្រសិនបើសូដ្យូមហ៊ីប៉ូក្លរីតមិនស័ក្តិសមសម្រាប់ការបន្សាបជាតិពុលផ្នែកលោហធាតុនៃឧបករណ៍។

តាមឧត្ដមគតិ បុគ្គលិកគួរតែគោរពតាមគោលការណ៍នៃលំហូរការងារឯកទិស ហើយមិនត្រូវចេញពីតំបន់កខ្វក់ (ក្រោយ PCR) ត្រឡប់ទៅតំបន់ស្អាត (មុន PCR) នៅថ្ងៃដដែលនោះទេ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ អាចមានពេលខ្លះដែលមិនអាចជៀសវាងបាន។ នៅពេលដែលឱកាសបែបនេះកើតឡើង បុគ្គលិកត្រូវតែប្រុងប្រយ័ត្នក្នុងការលាងដៃឱ្យបានស្អាត ប្តូរស្រោមដៃ ប្រើអាវមន្ទីរពិសោធន៍ដែលបានកំណត់ ហើយមិនត្រូវណែនាំឧបករណ៍ណាមួយដែលពួកគេចង់យកចេញពីបន្ទប់ម្តងទៀតទេ ដូចជាសៀវភៅមន្ទីរពិសោធន៍ជាដើម។ វិធានការត្រួតពិនិត្យបែបនេះគួរតែត្រូវបានសង្កត់ធ្ងន់នៅក្នុងការបណ្តុះបណ្តាលបុគ្គលិកលើវិធីសាស្ត្រម៉ូលេគុល។

បន្ទាប់ពីប្រើប្រាស់រួច កន្លែងអង្គុយគួរតែត្រូវបានសម្អាតដោយសូដ្យូមហ៊ីប៉ូក្លរីត ១០% (បន្ទាប់មកដោយទឹកស្អាតដើម្បីយកសារធាតុ bleach ដែលនៅសេសសល់ចេញ) អេតាណុល ៧០% ឬសារធាតុសម្លាប់មេរោគដែលបំផ្លាញ DNA ដែលមានសុពលភាពដែលមានលក់នៅលើទីផ្សារ។ តាមឧត្ដមគតិ ចង្កៀងអ៊ុលត្រាវីយូឡេ (UV) គួរតែត្រូវបានបំពាក់ដើម្បីឱ្យអាចសម្លាប់មេរោគដោយការបំភាយកាំរស្មី។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការប្រើប្រាស់ចង្កៀង UV គួរតែត្រូវបានកំណត់ចំពោះកន្លែងធ្វើការបិទជិត ឧទាហរណ៍ ទូសុវត្ថិភាព ដើម្បីកំណត់ការប៉ះពាល់នឹងកាំរស្មីយូវីរបស់បុគ្គលិកមន្ទីរពិសោធន៍។ សូមគោរពតាមការណែនាំរបស់អ្នកផលិតសម្រាប់ការថែទាំចង្កៀង UV ខ្យល់ចេញចូល និងការសម្អាត ដើម្បីធានាថាចង្កៀងនៅតែមានប្រសិទ្ធភាព។

ប្រសិនបើប្រើអេតាណុល 70% ជំនួសសូដ្យូមហ៊ីប៉ូក្លរីត ការបំភ្លឺដោយពន្លឺអ៊ុលត្រាវីយូឡេនឹងត្រូវការដើម្បីបញ្ចប់ការបន្សាបជាតិពុល។
កុំសម្អាតវល្លិ៍ និងម៉ាស៊ីនបង្វិលជាមួយសូដ្យូមហ៊ីប៉ូក្លរីត; ផ្ទុយទៅវិញ សូមជូតសម្អាតជាមួយអេតាណុល 70% ហើយដាក់ឱ្យត្រូវពន្លឺអ៊ុលត្រាវីយូឡេ ឬប្រើថ្នាំសម្លាប់មេរោគដែលបំផ្លាញ DNA ដែលមានពាណិជ្ជកម្ម។ ចំពោះការកំពប់ សូមពិនិត្យជាមួយអ្នកផលិតសម្រាប់ដំបូន្មានសម្អាតបន្ថែម។ ប្រសិនបើការណែនាំរបស់អ្នកផលិតអនុញ្ញាត បំពង់បឺតគួរតែត្រូវបានសម្លាប់មេរោគជាប្រចាំដោយប្រើម៉ាស៊ីនអូតូក្លេវ។ ប្រសិនបើបំពង់បឺតមិនអាចសម្លាប់មេរោគបានទេ វាគួរតែគ្រប់គ្រាន់ក្នុងការសម្អាតវាជាមួយសូដ្យូមហ៊ីប៉ូក្លរីត 10% (បន្ទាប់មកជូតសម្អាតឱ្យបានហ្មត់ចត់ជាមួយទឹកស្អាត) ឬជាមួយថ្នាំសម្លាប់មេរោគដែលបំផ្លាញ DNA ដែលមានពាណិជ្ជកម្ម បន្ទាប់មកដោយការប៉ះពាល់នឹងកាំរស្មីយូវី។

ការសម្អាតជាមួយសូដ្យូមហ៊ីប៉ូក្លរីតដែលមានភាគរយខ្ពស់អាចបំផ្លាញផ្លាស្ទិច និងលោហៈពីបែតនៅទីបំផុត ប្រសិនបើធ្វើជាប្រចាំ។ សូមពិនិត្យមើលការណែនាំពីក្រុមហ៊ុនផលិតជាមុនសិន។ ឧបករណ៍ទាំងអស់ត្រូវក្រិតតាមខ្នាតជាប្រចាំតាមកាលវិភាគដែលបានណែនាំដោយក្រុមហ៊ុនផលិត។ បុគ្គលដែលត្រូវបានចាត់តាំងគួរតែទទួលបន្ទុកធានាថាកាលវិភាគក្រិតតាមខ្នាតត្រូវបានអនុវត្តតាម កំណត់ហេតុលម្អិតត្រូវបានរក្សាទុក និងស្លាកសេវាកម្មត្រូវបានបង្ហាញយ៉ាងច្បាស់នៅលើឧបករណ៍។

៣. ដំបូន្មានអំពីការប្រើប្រាស់ និងការសម្អាតសម្រាប់លំហម៉ូលេគុលដែលបានកំណត់

មុន PCR៖ ការរៀបចំសារធាតុប្រតិកម្ម/ការលាយមេ៖ នេះគួរតែជាកន្លែងដែលស្អាតបំផុតក្នុងចំណោមកន្លែងដែលប្រើសម្រាប់ការរៀបចំការពិសោធន៍ម៉ូលេគុល ហើយតាមឧត្ដមគតិគួរតែជាទូលំហូរឡាមីណាដែលបានកំណត់ដែលបំពាក់ដោយពន្លឺយូវី។ គំរូ អាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកដែលស្រង់ចេញ និងផលិតផល PCR ដែលបានពង្រីកមិនត្រូវត្រូវបានដោះស្រាយនៅក្នុងតំបន់នេះទេ។ សារធាតុប្រតិកម្មពង្រីកគួរតែរក្សាទុកក្នុងទូរបង្កក (ឬទូរទឹកកក តាមការណែនាំរបស់អ្នកផលិត) ក្នុងកន្លែងដែលបានកំណត់ដូចគ្នា តាមឧត្ដមគតិនៅជាប់នឹងទូលំហូរឡាមីណា ឬតំបន់មុន PCR។ ស្រោមដៃគួរតែត្រូវបានផ្លាស់ប្តូររាល់ពេលនៅពេលចូលទៅក្នុងតំបន់មុន PCR ឬទូលំហូរឡាមីណា។

តំបន់មុន PCR ឬទូលំហូរ laminar គួរតែត្រូវបានសម្អាតមុន និងក្រោយពេលប្រើប្រាស់ដូចខាងក្រោម៖ ជូតសម្អាតរបស់របរទាំងអស់នៅក្នុងទូ ឧ. បំពង់បឺត ប្រអប់ដាក់ទឹក ម៉ាស៊ីន vortex ម៉ាស៊ីន centrifuge ធ្នើរបំពង់ ប៊ិច ជាដើម ដោយប្រើអេតាណុល 70% ឬសារធាតុសម្លាប់មេរោគដែលបំផ្លាញ DNA ហើយទុកឱ្យស្ងួត។ ក្នុងករណីដែលមានកន្លែងធ្វើការបិទជិត ឧ. ទូលំហូរ laminar សូមដាក់គម្របឱ្យត្រូវពន្លឺ UV រយៈពេល 30 នាទី។

កំណត់ចំណាំ

កុំ​ឲ្យ​សារធាតុ​ប្រតិកម្ម​ប៉ះពាល់​នឹង​ពន្លឺ UV; ផ្លាស់ទី​វា​ចូល​ក្នុង​ទូ​តែ​ពេល​វា​ស្អាត​ប៉ុណ្ណោះ។ ប្រសិនបើ​អនុវត្ត​វិធីសាស្ត្រ PCR ចម្លង​បញ្ច្រាស វាក៏អាចមានប្រយោជន៍ផងដែរក្នុងការជូតផ្ទៃ និងឧបករណ៍ជាមួយនឹងដំណោះស្រាយដែលបំបែក RNases នៅពេលប៉ះពាល់។ នេះអាចជួយជៀសវាងលទ្ធផលអវិជ្ជមានមិនពិតពីការរិចរិលអង់ស៊ីមនៃ RNA។ បន្ទាប់ពីការបន្សាបជាតិពុល និងមុនពេលរៀបចំល្បាយមេ ស្រោមដៃគួរតែត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរម្តងទៀត ហើយបន្ទាប់មកទូនឹងរួចរាល់សម្រាប់ប្រើប្រាស់។

មុន PCR៖ ការស្រង់ចេញ/ការបន្ថែមគំរូអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក៖

អាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកត្រូវតែស្រង់ចេញ និងដោះស្រាយនៅក្នុងតំបន់ដែលបានកំណត់ទីពីរ ដោយប្រើសំណុំបំពង់បឺត ចុងតម្រង ធ្នើរបំពង់ ស្រោមដៃស្រស់ អាវមន្ទីរពិសោធន៍ និងឧបករណ៍ផ្សេងទៀតដាច់ដោយឡែក។ តំបន់នេះក៏សម្រាប់បន្ថែមគំរូ ការគ្រប់គ្រង និងខ្សែនិន្នាការទៅក្នុងបំពង់ ឬចានមេស្ព្រិចផងដែរ។ ដើម្បីជៀសវាងការចម្លងរោគនៃគំរូអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកដែលបានស្រង់ចេញដែលកំពុងត្រូវបានវិភាគ វាត្រូវបានណែនាំឱ្យផ្លាស់ប្តូរស្រោមដៃមុនពេលដោះស្រាយការគ្រប់គ្រងវិជ្ជមាន ឬស្តង់ដារ និងប្រើសំណុំបំពង់បឺតដាច់ដោយឡែក។ សារធាតុប្រតិកម្ម PCR និងផលិតផលពង្រីកមិនត្រូវបឺតនៅក្នុងតំបន់នេះទេ។ គំរូគួរតែត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងទូរទឹកកក ឬទូរបង្កកដែលបានកំណត់នៅក្នុងតំបន់ដូចគ្នា។ កន្លែងធ្វើការគំរូគួរតែត្រូវបានសម្អាតតាមរបៀបដូចគ្នានឹងកន្លែងមេស្ព្រិចដែរ។

ក្រោយ PCR៖ ការពង្រីក និងការគ្រប់គ្រងផលិតផលដែលបានពង្រីក

កន្លែងដែលបានកំណត់នេះគឺសម្រាប់ដំណើរការក្រោយការពង្រីក ហើយគួរតែដាច់ដោយឡែកពីតំបន់មុន PCR។ ជាធម្មតាវាមានឧបករណ៍កម្តៅ និងវេទិកាពេលវេលាជាក់ស្តែង ហើយតាមឧត្ដមគតិគួរតែមានទូលំហូរ laminar សម្រាប់បន្ថែមផលិតផល PCR ជុំទី 1 ទៅក្នុងប្រតិកម្មជុំទី 2 ប្រសិនបើ PCR ដែលដាក់បញ្ចូលគ្នាកំពុងត្រូវបានអនុវត្ត។ សារធាតុប្រតិកម្ម PCR និងអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកដែលស្រង់ចេញមិនត្រូវដោះស្រាយនៅក្នុងតំបន់នេះទេ ព្រោះហានិភ័យនៃការចម្លងរោគគឺខ្ពស់។ តំបន់នេះគួរតែមានស្រោមដៃ អាវមន្ទីរពិសោធន៍ ធ្នើរចាន និងបំពង់ បំពង់បឺត ចុងតម្រង ធុង និងឧបករណ៍ផ្សេងទៀតដាច់ដោយឡែក។ បំពង់ត្រូវតែត្រូវបានបង្វិល centrifuge មុនពេលបើក។ កន្លែងធ្វើការគំរូគួរតែត្រូវបានសម្អាតតាមរបៀបដូចគ្នានឹងកន្លែងលាយមេ។

ក្រោយ PCR៖ ការវិភាគផលិតផល

បន្ទប់នេះគឺសម្រាប់ឧបករណ៍រកឃើញផលិតផល ឧ. ធុងអេឡិចត្រូផូរេស៊ីសជែល កញ្ចប់ថាមពល ឧបករណ៍បំភ្លឺកាំរស្មីយូវី និងប្រព័ន្ធឯកសារជែល។ តំបន់នេះគួរតែមានស្រោមដៃដាច់ដោយឡែក អាវមន្ទីរពិសោធន៍ ធ្នើរចាន និងបំពង់ បំពង់បឺត ចុងតម្រង ធុង និងឧបករណ៍ផ្សេងៗទៀត។ មិនអនុញ្ញាតឱ្យយកសារធាតុប្រតិកម្មផ្សេងទៀតចូលទៅក្នុងតំបន់នេះទេ លើកលែងតែថ្នាំជ្រលក់ផ្ទុក សញ្ញាសម្គាល់ម៉ូលេគុល និងជែលអាហ្គារ៉ូស និងសមាសធាតុសតិបណ្ដោះអាសន្ន។ កន្លែងធ្វើការគំរូគួរតែត្រូវបានសម្អាតតាមរបៀបដូចគ្នានឹងកន្លែងលាយមេ។

កំណត់ចំណាំសំខាន់

តាមឧត្ដមគតិ បន្ទប់មុន PCR មិនគួរចូលនៅថ្ងៃតែមួយទេ ប្រសិនបើការងារត្រូវបានអនុវត្តរួចហើយនៅក្នុងបន្ទប់ក្រោយ PCR។ ប្រសិនបើរឿងនេះមិនអាចជៀសវាងបានទាំងស្រុង សូមធានាថាដៃត្រូវបានលាងសម្អាតឱ្យបានហ្មត់ចត់ជាមុនសិន ហើយត្រូវពាក់អាវមន្ទីរពិសោធន៍ជាក់លាក់នៅក្នុងបន្ទប់ទាំងនោះ។ សៀវភៅមន្ទីរពិសោធន៍ និងឯកសារមិនត្រូវយកចូលទៅក្នុងបន្ទប់មុន PCR ទេ ប្រសិនបើវាត្រូវបានប្រើប្រាស់នៅក្នុងបន្ទប់ក្រោយ PCR។ បើចាំបាច់ សូមយកច្បាប់ចម្លងនៃពិធីការ/លេខសម្គាល់គំរូ។ល។

៤. ដំបូន្មានទូទៅអំពីជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល

ប្រើស្រោមដៃគ្មានម្សៅដើម្បីជៀសវាងការរារាំងការវិភាគ។ បច្ចេកទេសបំពង់បឺតត្រឹមត្រូវគឺមានសារៈសំខាន់បំផុតក្នុងការកាត់បន្ថយការចម្លងរោគ។ បំពង់បឺតមិនត្រឹមត្រូវអាចបណ្តាលឱ្យមានការហៀរចេញនៅពេលចែកចាយសារធាតុរាវ និងការបង្កើតអេរ៉ូសូល។ ការអនុវត្តល្អសម្រាប់ការបឺតត្រឹមត្រូវអាចរកបាននៅតំណភ្ជាប់ខាងក្រោម៖ ការណែនាំរបស់ Gilson អំពីការបឺត, វីដេអូបច្ចេកទេសបំពង់បឺត Anachem, បំពង់បង្វិលមុនពេលបើក ហើយបើកវាដោយប្រុងប្រយ័ត្នដើម្បីជៀសវាងការហៀរចេញ។ បិទបំពង់ភ្លាមៗបន្ទាប់ពីប្រើដើម្បីជៀសវាងការបញ្ចូលសារធាតុចម្លងរោគ។

នៅពេលអនុវត្តប្រតិកម្មច្រើន សូមរៀបចំល្បាយមេមួយដែលមានផ្ទុកសារធាតុប្រតិកម្មទូទៅ (ឧ. ទឹក dNTPs សារធាតុសតិបណ្ដោះអាសន្ន សារធាតុបឋម និងអង់ស៊ីម) ដើម្បីកាត់បន្ថយចំនួននៃការផ្ទេរសារធាតុប្រតិកម្ម និងកាត់បន្ថយការគំរាមកំហែងនៃការចម្លងរោគ។ វាត្រូវបានណែនាំឱ្យរៀបចំល្បាយមេនៅលើទឹកកក ឬប្លុកត្រជាក់។ ការប្រើប្រាស់អង់ស៊ីម Hot Start អាចជួយកាត់បន្ថយការផលិតផលិតផលមិនជាក់លាក់។ ការពារសារធាតុប្រតិកម្មដែលមានសារធាតុស៊ើបអង្កេត fluorescent ពីពន្លឺ ដើម្បីជៀសវាងការរិចរិល។

៥. ការគ្រប់គ្រងផ្ទៃក្នុង

រួមបញ្ចូលការគ្រប់គ្រងវិជ្ជមាន និងអវិជ្ជមានដែលត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈយ៉ាងល្អ រួមជាមួយនឹងការគ្រប់គ្រងដែលគ្មានគំរូនៅក្នុងប្រតិកម្មទាំងអស់ និងខ្សែនិន្នាការដែលមានការកែសម្រួលច្រើនចំណុចសម្រាប់ប្រតិកម្មបរិមាណ។ ការគ្រប់គ្រងវិជ្ជមានមិនគួរខ្លាំងពេកដែលវាបង្កហានិភ័យនៃការចម្លងរោគនោះទេ។ រួមបញ្ចូលការគ្រប់គ្រងការទាញយកវិជ្ជមាន និងអវិជ្ជមាននៅពេលអនុវត្តការទាញយកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក។

វាត្រូវបានណែនាំថា ការណែនាំច្បាស់លាស់គួរតែត្រូវបានបិទផ្សាយនៅក្នុងតំបន់នីមួយៗ ដើម្បីឱ្យអ្នកប្រើប្រាស់បានដឹងអំពីច្បាប់នៃការប្រព្រឹត្ត។ មន្ទីរពិសោធន៍វិនិច្ឆ័យរោគដែលរកឃើញកម្រិតទាបខ្លាំងនៃ DNA ឬ RNA នៅក្នុងសំណាកគ្លីនិក អាចចង់អនុម័តវិធានការសុវត្ថិភាពបន្ថែមនៃការមានប្រព័ន្ធគ្រប់គ្រងខ្យល់ដាច់ដោយឡែកដែលមានសម្ពាធខ្យល់វិជ្ជមានបន្តិចនៅក្នុងបន្ទប់មុន PCR និងសម្ពាធខ្យល់អវិជ្ជមានបន្តិចនៅក្នុងបន្ទប់ក្រោយ PCR។

ជាចុងក្រោយ ការបង្កើតផែនការធានាគុណភាព (QA) គឺមានប្រយោជន៍។ ផែនការបែបនេះគួរតែរួមបញ្ចូលបញ្ជីស្តុកសារធាតុមេ និងស្តុកការងារ ច្បាប់សម្រាប់រក្សាទុកឧបករណ៍ និងសារធាតុ ការរាយការណ៍អំពីលទ្ធផលត្រួតពិនិត្យ កម្មវិធីបណ្តុះបណ្តាលបុគ្គលិក ក្បួនដោះស្រាយដោះស្រាយបញ្ហា និងសកម្មភាពកែតម្រូវនៅពេលចាំបាច់។

៦. គន្ថនិទ្ទេស

Aslan A, Kinzelman J, Dreelin E, Anan'eva T, Lavander J. ជំពូកទី 3: ការបង្កើតមន្ទីរពិសោធន៍ qPCR។ ឯកសារណែនាំសម្រាប់ការធ្វើតេស្តទឹកកម្សាន្តដោយប្រើវិធីសាស្ត្រ USEPA qPCR 1611។ Lansing - សាកលវិទ្យាល័យរដ្ឋ Michigan។

សុខភាពសាធារណៈអង់គ្លេស, NHS។ ស្តង់ដារចក្រភពអង់គ្លេសសម្រាប់ការស៊ើបអង្កេតអតិសុខុមជីវសាស្ត្រ៖ ការអនុវត្តមន្ទីរពិសោធន៍ល្អនៅពេលអនុវត្តការវិភាគពង្រីកម៉ូលេគុល)។ ការណែនាំអំពីគុណភាព។ 2013;4(4):1–15។

Mifflin T. ការបង្កើតមន្ទីរពិសោធន៍ PCR។ ពិធីសារ Cold Spring Harb។ 2007;7។

Schroeder S 2013។ ការថែទាំជាប្រចាំនៃម៉ាស៊ីន centrifuge៖ ការសម្អាត ការថែទាំ និងការសម្លាប់មេរោគនៃម៉ាស៊ីន centrifuge រ៉ូទ័រ និងឧបករណ៍ភ្ជាប់ (ឯកសារសលេខ 14)។ ហាំប៊ឺក៖ Eppendorf; 2013។

Viana RV, Wallis CL។ ការអនុវត្តមន្ទីរពិសោធន៍គ្លីនិកល្អ (GCLP) សម្រាប់ការធ្វើតេស្តផ្អែកលើម៉ូលេគុលដែលប្រើក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍វិនិច្ឆ័យ។ ក្នុង៖ Akyar I, អ្នកកែសម្រួល។ វិសាលគមទូលំទូលាយនៃការគ្រប់គ្រងគុណភាព។ Rijeka, ក្រូអាស៊ី៖ Intech; 2011: 29–52។