మాలిక్యులర్ టెస్టింగ్ కోసం చేయవలసినవి మరియు చేయకూడనివి

నమూనాలలో ఉండే అతి తక్కువ పరిమాణాలను వృద్ధి చేయడం ద్వారా, అణు గుర్తింపు పద్ధతులు అధిక పరిమాణంలో న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాన్ని ఉత్పత్తి చేయగలవు. ఇది సున్నితమైన గుర్తింపును సాధ్యం చేయడానికి ప్రయోజనకరంగా ఉన్నప్పటికీ, ప్రయోగశాల వాతావరణంలో వృద్ధి ఏరోసోల్స్ వ్యాపించడం ద్వారా కాలుష్యం సంభవించే అవకాశాన్ని కూడా ఇది కల్పిస్తుంది. ప్రయోగాలు చేసేటప్పుడు, రసాయనాలు, ప్రయోగశాల పరికరాలు మరియు బల్ల ప్రదేశం కలుషితం కాకుండా నివారించడానికి చర్యలు తీసుకోవచ్చు, ఎందుకంటే అటువంటి కాలుష్యం తప్పుడు-పాజిటివ్ (లేదా తప్పుడు-నెగటివ్) ఫలితాలను ఇవ్వవచ్చు.

కలుషితమయ్యే అవకాశాన్ని తగ్గించడానికి, మంచి ప్రయోగశాల పద్ధతులను అన్ని సమయాల్లోనూ పాటించాలి. ప్రత్యేకంగా, ఈ క్రింది అంశాలకు సంబంధించి జాగ్రత్తలు తీసుకోవాలి:

1. రసాయనాలను నిర్వహించడం
2. కార్యస్థలం మరియు పరికరాల అమరిక
3. నిర్దేశిత అణు స్థలం కోసం ఉపయోగం మరియు శుభ్రపరిచే సలహా
4. సాధారణ అణు జీవశాస్త్ర సలహా
5. అంతర్గత నియంత్రణలు
6. గ్రంథ పట్టిక

1. రసాయనాలను నిర్వహించడం

ఏరోసోల్స్ ఏర్పడకుండా ఉండేందుకు, రీఏజెంట్ ట్యూబ్‌లను తెరిచే ముందు క్లుప్తంగా సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయండి. పదేపదే గడ్డకట్టించి కరిగించడాన్ని మరియు మాస్టర్ స్టాక్స్ కలుషితం కాకుండా ఉండేందుకు రీఏజెంట్లను చిన్న భాగాలుగా విభజించండి. అన్ని రీఏజెంట్ మరియు రియాక్షన్ ట్యూబ్‌లపై స్పష్టంగా లేబుల్ చేసి, తేదీని రాయండి మరియు అన్ని ప్రయోగాలలో ఉపయోగించిన రీఏజెంట్ లాట్ మరియు బ్యాచ్ నంబర్ల లాగ్‌లను నిర్వహించండి. ఫిల్టర్ టిప్స్‌ను ఉపయోగించి అన్ని రీఏజెంట్లను మరియు నమూనాలను పైపెట్ చేయండి. కొనుగోలు చేయడానికి ముందు, ఉపయోగించబోయే పైపెట్ బ్రాండ్‌కు ఫిల్టర్ టిప్స్ సరిపోతాయో లేదో తయారీదారుతో నిర్ధారించుకోవడం మంచిది.

2. కార్యస్థలం మరియు పరికరాల అమరిక

పని ప్రవాహం శుభ్రమైన ప్రదేశాల (PCRకు ముందు) నుండి మురికి ప్రదేశాలకు (PCR తర్వాత) ఒకే దిశలో జరిగేలా కార్యస్థలాన్ని ఏర్పాటు చేసుకోవాలి. ఈ క్రింది సాధారణ జాగ్రత్తలు కాలుష్యం యొక్క అవకాశాన్ని తగ్గించడానికి సహాయపడతాయి. మాస్టర్‌మిక్స్ తయారీ, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ సంగ్రహణ మరియు DNA టెంప్లేట్ జోడింపు, యాంప్లిఫికేషన్ మరియు యాంప్లిఫైడ్ ఉత్పత్తి యొక్క నిర్వహణ, మరియు ఉత్పత్తి విశ్లేషణ (ఉదా. జెల్ ఎలక్ట్రోఫోరెసిస్) కోసం ప్రత్యేకంగా కేటాయించిన గదులను, లేదా కనీసం భౌతికంగా వేరు చేయబడిన ప్రదేశాలను కలిగి ఉండండి.

కొన్ని పరిస్థితులలో, 4 వేర్వేరు గదులను కలిగి ఉండటం కష్టం. ఒక సాధ్యమైన కానీ అంతగా ఆమోదయోగ్యం కాని ఎంపిక ఏమిటంటే, మాస్టర్‌మిక్స్ తయారీని ఒక నియంత్రిత ప్రదేశంలో (కంటైన్‌మెంట్ ఏరియా), ఉదాహరణకు లామినార్ ఫ్లో క్యాబినెట్‌లో చేయడం. నెస్ట్డ్ PCR యాంప్లిఫికేషన్ విషయంలో, రెండవ రౌండ్ రియాక్షన్ కోసం మాస్టర్‌మిక్స్ తయారీని 'క్లీన్' ఏరియాలో చేయాలి, కానీ ప్రైమరీ PCR ప్రొడక్ట్‌తో ఇనాక్యులేషన్‌ను యాంప్లిఫికేషన్ గదిలో, మరియు వీలైతే ఒక ప్రత్యేక నియంత్రిత ప్రదేశంలో (ఉదాహరణకు లామినార్ ఫ్లో క్యాబినెట్) చేయాలి.

ప్రతి గది/ప్రాంతానికి స్పష్టంగా లేబుల్ చేయబడిన పైపెట్లు, ఫిల్టర్ టిప్స్, ట్యూబ్ ర్యాక్‌లు, వోర్టెక్స్‌లు, సెంట్రిఫ్యూజ్‌లు (అవసరమైతే), పెన్నులు, సాధారణ ల్యాబ్ రీఏజెంట్లు, ల్యాబ్ కోట్లు మరియు గ్లౌజుల పెట్టెలు విడివిడిగా అవసరం. ఇవి ఆయా వర్క్‌స్టేషన్‌ల వద్దే ఉంచబడతాయి. నిర్దేశిత ప్రాంతాల మధ్య తిరిగేటప్పుడు చేతులు కడుక్కోవాలి మరియు గ్లౌజులు, ల్యాబ్ కోట్లు మార్చుకోవాలి. రీఏజెంట్లు మరియు పరికరాలను మురికి ప్రాంతం నుండి శుభ్రమైన ప్రాంతానికి తరలించకూడదు. ఒకవేళ ఏదైనా రీఏజెంట్ లేదా పరికరాన్ని వెనక్కి తరలించాల్సిన అత్యవసర పరిస్థితి ఏర్పడితే, దానిని మొదట 10% సోడియం హైపోక్లోరైట్‌తో క్రిమిరహితం చేసి, ఆ తర్వాత శుభ్రమైన నీటితో తుడవాలి.

గమనిక

10% సోడియం హైపోక్లోరైట్ ద్రావణాన్ని ప్రతిరోజూ తాజాగా తయారు చేయాలి. క్రిమిసంహారం కోసం ఉపయోగించినప్పుడు, కనీసం 10 నిమిషాల సంపర్క సమయాన్ని తప్పనిసరిగా పాటించాలి.
ప్రత్యామ్నాయంగా, స్థానిక భద్రతా సిఫార్సులు సోడియం హైపోక్లోరైట్ వాడకాన్ని అనుమతించకపోతే లేదా పరికరాల లోహ భాగాలను శుభ్రపరచడానికి సోడియం హైపోక్లోరైట్ అనుకూలంగా లేకపోతే, DNAను నాశనం చేసే ఉపరితల శుభ్రపరిచే పదార్థాలుగా ధృవీకరించబడిన వాణిజ్యపరంగా లభించే ఉత్పత్తులను ఉపయోగించవచ్చు.

ఆదర్శంగా, సిబ్బంది ఒకే దిశలో పనిచేసే విధానాన్ని పాటించాలి మరియు అదే రోజున మురికి ప్రదేశాల (పీసీఆర్ తర్వాత) నుండి తిరిగి శుభ్రమైన ప్రదేశాలకు (పీసీఆర్ ముందు) వెళ్లకూడదు. అయితే, కొన్ని సందర్భాల్లో ఇది తప్పనిసరి కావచ్చు. అటువంటి సందర్భం వచ్చినప్పుడు, సిబ్బంది తప్పనిసరిగా చేతులను శుభ్రంగా కడుక్కోవాలి, గ్లౌజులు మార్చుకోవాలి, కేటాయించిన ల్యాబ్ కోటును ధరించాలి మరియు ల్యాబ్ పుస్తకాల వంటి, తాము మళ్లీ గది నుండి బయటకు తీసుకెళ్లాలనుకునే ఏ పరికరాన్నీ లోపలికి తీసుకురాకూడదు. మాలిక్యులర్ పద్ధతులపై సిబ్బందికి ఇచ్చే శిక్షణలో ఇటువంటి నియంత్రణ చర్యలకు ప్రాధాన్యత ఇవ్వాలి.

ఉపయోగించిన తర్వాత, బెంచ్ ప్రదేశాలను 10% సోడియం హైపోక్లోరైట్ (మిగిలిపోయిన బ్లీచ్‌ను తొలగించడానికి తర్వాత శుభ్రమైన నీటితో), 70% ఇథనాల్, లేదా ధృవీకరించబడిన, వాణిజ్యపరంగా లభించే DNA-నాశనం చేసే క్రిమిసంహారక ద్రావణంతో శుభ్రపరచాలి. ఆదర్శవంతంగా, వికిరణం ద్వారా క్రిమిసంహారక చర్యను సాధ్యం చేయడానికి అతినీలలోహిత (UV) దీపాలను అమర్చాలి. అయితే, ప్రయోగశాల సిబ్బందిపై UV కిరణాల ప్రభావాన్ని పరిమితం చేయడానికి, UV దీపాల వాడకాన్ని భద్రతా క్యాబినెట్‌ల వంటి మూసి ఉన్న పని ప్రదేశాలకే పరిమితం చేయాలి. దీపాలు సమర్థవంతంగా పనిచేసేలా చూసుకోవడానికి, దయచేసి UV దీపాల సంరక్షణ, వెంటిలేషన్ మరియు శుభ్రపరచడం కోసం తయారీదారు సూచనలను పాటించండి.

సోడియం హైపోక్లోరైట్‌కు బదులుగా 70% ఇథనాల్‌ను ఉపయోగిస్తే, కాలుష్య నిర్మూలనను పూర్తి చేయడానికి UV కాంతితో ప్రసరింపజేయడం అవసరం అవుతుంది.
వోర్టెక్స్ మరియు సెంట్రిఫ్యూజ్‌ను సోడియం హైపోక్లోరైట్‌తో శుభ్రం చేయవద్దు; దానికి బదులుగా, 70% ఇథనాల్‌తో తుడిచి, UV కాంతికి గురిచేయండి, లేదా వాణిజ్యపరమైన DNA-నాశనం చేసే డికంటామినెంట్‌ను ఉపయోగించండి. ఏవైనా ఒలికిపోతే, తదుపరి శుభ్రపరిచే సలహా కోసం తయారీదారుని సంప్రదించండి. తయారీదారు సూచనలు అనుమతిస్తే, పైపెట్లను ఆటోక్లేవ్ ద్వారా క్రమం తప్పకుండా స్టెరిలైజ్ చేయాలి. పైపెట్లను ఆటోక్లేవ్ చేయలేకపోతే, వాటిని 10% సోడియం హైపోక్లోరైట్‌తో (ఆ తర్వాత శుభ్రమైన నీటితో పూర్తిగా తుడిచి) లేదా వాణిజ్యపరమైన DNA-నాశనం చేసే డికంటామినెంట్‌తో శుభ్రం చేసి, ఆ తర్వాత UV కాంతికి గురిచేస్తే సరిపోతుంది.

అధిక శాతం సోడియం హైపోక్లోరైట్‌తో క్రమం తప్పకుండా శుభ్రపరచడం వల్ల కాలక్రమేణా పైపెట్ ప్లాస్టిక్‌లు మరియు లోహాలు దెబ్బతినవచ్చు; ముందుగా తయారీదారు సిఫార్సులను తనిఖీ చేయండి. తయారీదారు సిఫార్సు చేసిన షెడ్యూల్ ప్రకారం అన్ని పరికరాలను క్రమం తప్పకుండా క్రమాంకనం చేయాలి. క్రమాంకన షెడ్యూల్‌కు కట్టుబడి ఉండేలా, వివరణాత్మక లాగ్‌లను నిర్వహించేలా మరియు పరికరాలపై సర్వీస్ లేబుల్‌లను స్పష్టంగా ప్రదర్శించేలా చూసే బాధ్యతను ఒక నియమిత వ్యక్తికి అప్పగించాలి.

3. నిర్దేశిత అణు స్థలం కోసం ఉపయోగం మరియు శుభ్రపరిచే సలహా

ప్రీ-పిసిఆర్: రిఏజెంట్ అలిక్వోటింగ్ / మాస్టర్‌మిక్స్ తయారీ: మాలిక్యులర్ ప్రయోగాల తయారీకి ఉపయోగించే అన్ని ప్రదేశాలలో ఇది అత్యంత పరిశుభ్రంగా ఉండాలి మరియు ఆదర్శంగా ఇది UV లైట్‌తో కూడిన ఒక ప్రత్యేక లామినార్ ఫ్లో క్యాబినెట్ అయి ఉండాలి. నమూనాలు, సంగ్రహించిన న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం మరియు యాంప్లిఫై చేయబడిన పిసిఆర్ ఉత్పత్తులను ఈ ప్రాంతంలో తాకకూడదు. యాంప్లిఫికేషన్ రిఏజెంట్లను అదే ప్రత్యేక ప్రదేశంలో, ఆదర్శంగా లామినార్ ఫ్లో క్యాబినెట్ లేదా ప్రీ-పిసిఆర్ ప్రాంతం పక్కన, ఒక ఫ్రీజర్‌లో (లేదా తయారీదారు సిఫార్సుల ప్రకారం రిఫ్రిజిరేటర్‌లో) ఉంచాలి. ప్రీ-పిసిఆర్ ప్రాంతం లేదా లామినార్ ఫ్లో క్యాబినెట్‌లోకి ప్రవేశించిన ప్రతిసారీ గ్లౌజులను మార్చుకోవాలి.

ప్రీ-పిసిఆర్ ప్రాంతాన్ని లేదా లామినార్ ఫ్లో క్యాబినెట్‌ను ఉపయోగించడానికి ముందు మరియు తర్వాత ఈ క్రింది విధంగా శుభ్రపరచాలి: క్యాబినెట్‌లోని పైపెట్లు, టిప్ బాక్సులు, వోర్టెక్స్, సెంట్రిఫ్యూజ్, ట్యూబ్ ర్యాక్‌లు, పెన్నులు మొదలైన అన్ని వస్తువులను 70% ఇథనాల్ లేదా వాణిజ్యపరమైన DNA-నాశనం చేసే డికాంటామినెంట్‌తో తుడిచి, ఆరనివ్వండి. ఒకవేళ లామినార్ ఫ్లో క్యాబినెట్ వంటి మూసి ఉన్న పని ప్రదేశం అయితే, హుడ్‌ను 30 నిమిషాల పాటు UV కాంతికి గురిచేయండి.

గమనిక

రిఏజెంట్లను UV కాంతికి గురిచేయవద్దు; క్యాబినెట్ శుభ్రపరిచిన తర్వాత మాత్రమే వాటిని అందులోకి తరలించండి. రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ PCR చేస్తున్నట్లయితే, తాకిన వెంటనే RNaseలను విచ్ఛిన్నం చేసే ద్రావణంతో ఉపరితలాలు మరియు పరికరాలను తుడవడం కూడా సహాయకరంగా ఉంటుంది. ఇది RNA యొక్క ఎంజైమ్ విచ్ఛిన్నం వలన వచ్చే తప్పుడు-ప్రతికూల ఫలితాలను నివారించడానికి సహాయపడవచ్చు. క్రిమిరహితం చేసిన తర్వాత మరియు మాస్టర్‌మిక్స్ తయారుచేయడానికి ముందు, గ్లౌజులను మరోసారి మార్చుకోవాలి, ఆ తర్వాత క్యాబినెట్ ఉపయోగించడానికి సిద్ధంగా ఉంటుంది.

ప్రీ-పిసిఆర్: న్యూక్లియిక్ ఆమ్ల సంగ్రహణ/టెంప్లేట్ జోడింపు:

న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాన్ని రెండవ నిర్దేశిత ప్రదేశంలో, ప్రత్యేకమైన పైపెట్లు, ఫిల్టర్ టిప్స్, ట్యూబ్ ర్యాక్‌లు, కొత్త గ్లౌజులు, ల్యాబ్ కోట్లు మరియు ఇతర పరికరాలను ఉపయోగించి సంగ్రహించి, నిర్వహించాలి. మాస్టర్‌మిక్స్ ట్యూబ్‌లు లేదా ప్లేట్‌లకు టెంప్లేట్, కంట్రోల్స్ మరియు ట్రెండ్‌లైన్‌లను జోడించడానికి కూడా ఈ ప్రదేశమే ఉద్దేశించబడింది. విశ్లేషించబడుతున్న సంగ్రహించిన న్యూక్లియిక్ ఆమ్ల నమూనాలు కలుషితం కాకుండా ఉండటానికి, పాజిటివ్ కంట్రోల్స్ లేదా స్టాండర్డ్స్‌ను నిర్వహించే ముందు గ్లౌజులు మార్చుకోవాలని మరియు ప్రత్యేకమైన పైపెట్ల సెట్‌ను ఉపయోగించాలని సిఫార్సు చేయబడింది. PCR రియేజెంట్లు మరియు యాంప్లిఫైడ్ ఉత్పత్తులను ఈ ప్రదేశంలో పైపెట్ చేయకూడదు. నమూనాలను అదే ప్రదేశంలోని నిర్దేశిత ఫ్రిజ్‌లు లేదా ఫ్రీజర్‌లలో నిల్వ చేయాలి. మాస్టర్‌మిక్స్ ప్రదేశాన్ని శుభ్రపరిచిన విధంగానే నమూనా పని ప్రదేశాన్ని కూడా శుభ్రపరచాలి.

PCR తర్వాత: యాంప్లిఫికేషన్ మరియు యాంప్లిఫైడ్ ఉత్పత్తి నిర్వహణ

ఈ నిర్దేశిత స్థలం యాంప్లిఫికేషన్ అనంతర ప్రక్రియల కోసం ఉద్దేశించబడింది మరియు ఇది ప్రీ-పిసిఆర్ ప్రాంతాల నుండి భౌతికంగా వేరుగా ఉండాలి. ఇందులో సాధారణంగా థర్మోసైక్లర్లు మరియు రియల్-టైమ్ ప్లాట్‌ఫారమ్‌లు ఉంటాయి, మరియు ఒకవేళ నెస్టెడ్ పిసిఆర్ నిర్వహిస్తున్నట్లయితే, రౌండ్ 1 పిసిఆర్ ఉత్పత్తిని రౌండ్ 2 రియాక్షన్‌కు జోడించడం కోసం ఆదర్శంగా ఒక లామినార్ ఫ్లో క్యాబినెట్ ఉండాలి. కలుషితమయ్యే ప్రమాదం ఎక్కువగా ఉన్నందున, ఈ ప్రాంతంలో పిసిఆర్ రియేజెంట్లు మరియు సంగ్రహించిన న్యూక్లియిక్ యాసిడ్‌ను తాకకూడదు. ఈ ప్రాంతంలో ప్రత్యేకమైన గ్లౌజులు, ల్యాబ్ కోట్లు, ప్లేట్ మరియు ట్యూబ్ ర్యాక్‌లు, పైపెట్లు, ఫిల్టర్ టిప్స్, బిన్‌లు మరియు ఇతర పరికరాలు ఉండాలి. ట్యూబ్‌లను తెరిచే ముందు తప్పనిసరిగా సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయాలి. మాస్టర్‌మిక్స్ స్థలాన్ని శుభ్రపరిచిన విధంగానే శాంపిల్ వర్క్‌స్పేస్‌ను కూడా శుభ్రపరచాలి.

పోస్ట్-పిసిఆర్: ఉత్పత్తి విశ్లేషణ

ఈ గది జెల్ ఎలక్ట్రోఫోరెసిస్ ట్యాంకులు, పవర్ ప్యాక్‌లు, UV ట్రాన్స్‌ఇల్యూమినేటర్ మరియు జెల్ డాక్యుమెంటేషన్ సిస్టమ్ వంటి ఉత్పత్తి గుర్తింపు పరికరాల కోసం ఉద్దేశించబడింది. ఈ ప్రాంతంలో వేర్వేరు గ్లౌజులు, ల్యాబ్ కోట్లు, ప్లేట్ మరియు ట్యూబ్ ర్యాక్‌లు, పైపెట్లు, ఫిల్టర్ టిప్‌లు, బిన్‌లు మరియు ఇతర పరికరాలు ఉండాలి. లోడింగ్ డై, మాలిక్యులర్ మార్కర్ మరియు అగరోస్ జెల్, మరియు బఫర్ కాంపోనెంట్‌లు మినహా, ఇతర ఏ రియేజెంట్‌లను ఈ ప్రాంతంలోకి తీసుకురాకూడదు. మాస్టర్‌మిక్స్ స్పేస్‌ను శుభ్రపరిచిన విధంగానే శాంపిల్ వర్క్‌స్పేస్‌ను కూడా శుభ్రపరచాలి.

ముఖ్యమైన గమనిక

ఆదర్శవంతంగా, పోస్ట్-పిసిఆర్ గదులలో ఇప్పటికే పని పూర్తి చేసినట్లయితే, అదే రోజున ప్రీ-పిసిఆర్ గదులలోకి ప్రవేశించకూడదు. ఒకవేళ ఇది పూర్తిగా తప్పనిసరి అయితే, ముందుగా చేతులను క్షుణ్ణంగా కడుక్కోవాలని మరియు గదులలో నిర్దిష్ట ల్యాబ్ కోట్లను ధరించాలని నిర్ధారించుకోండి. పోస్ట్-పిసిఆర్ గదులలో ఉపయోగించిన ల్యాబ్ పుస్తకాలు మరియు పత్రాలను ప్రీ-పిసిఆర్ గదులలోకి తీసుకురాకూడదు; అవసరమైతే, ప్రోటోకాల్స్/శాంపిల్ ఐడిలు మొదలైన వాటి డూప్లికేట్ ప్రింట్-అవుట్‌లను తీసుకోండి.

4. సాధారణ అణు జీవశాస్త్ర సలహా

అస్సే ఇన్హిబిషన్‌ను నివారించడానికి పౌడర్-ఫ్రీ గ్లోవ్స్ వాడండి. కలుషితాన్ని తగ్గించడానికి సరైన పైపెటింగ్ పద్ధతి చాలా ముఖ్యం. తప్పుగా పైపెటింగ్ చేయడం వల్ల ద్రవాలను పంపిణీ చేసేటప్పుడు అవి చిందడం మరియు ఏరోసోల్స్ ఏర్పడటం జరగవచ్చు. సరైన పైపెటింగ్ కోసం మంచి పద్ధతులను ఈ క్రింది లింకులలో చూడవచ్చు: గిల్సన్ గైడ్ టు పైపెటింగ్, అనకెమ్ పైపెటింగ్ టెక్నిక్ వీడియోలు, సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్‌లను తెరిచే ముందు, చిందకుండా జాగ్రత్తగా తెరవండి. కలుషితాలు ప్రవేశించకుండా ఉండటానికి ఉపయోగించిన వెంటనే ట్యూబ్‌లను మూసివేయండి.

అనేక చర్యలను నిర్వహిస్తున్నప్పుడు, రిఏజెంట్ల బదిలీల సంఖ్యను తగ్గించడానికి మరియు కలుషితమయ్యే ప్రమాదాన్ని తగ్గించడానికి, సాధారణ రిఏజెంట్లు (ఉదా. నీరు, dNTPలు, బఫర్, ప్రైమర్లు మరియు ఎంజైమ్) కలిగిన ఒక మాస్టర్‌మిక్స్‌ను సిద్ధం చేయండి. మాస్టర్‌మిక్స్‌ను ఐస్ లేదా కోల్డ్ బ్లాక్‌పై ఏర్పాటు చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది. హాట్ స్టార్ట్ ఎంజైమ్ వాడకం నిర్దిష్టేతర ఉత్పత్తుల ఉత్పత్తిని తగ్గించడంలో సహాయపడవచ్చు. క్షీణతను నివారించడానికి ఫ్లోరోసెంట్ ప్రోబ్‌లను కలిగి ఉన్న రిఏజెంట్లను కాంతి నుండి రక్షించండి.

5. అంతర్గత నియంత్రణలు

అన్ని చర్యలలో, చక్కగా వర్గీకరించబడిన, ధృవీకరించబడిన పాజిటివ్ మరియు నెగటివ్ కంట్రోల్స్‌తో పాటు, టెంప్లేట్ లేని కంట్రోల్‌ను మరియు పరిమాణాత్మక చర్యల కోసం మల్టీ-పాయింట్ టైట్రేటెడ్ ట్రెండ్‌లైన్‌ను చేర్చండి. పాజిటివ్ కంట్రోల్ కలుషితమయ్యే ప్రమాదాన్ని కలిగించేంత బలంగా ఉండకూడదు. న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ ఎక్స్‌ట్రాక్షన్ చేసేటప్పుడు పాజిటివ్ మరియు నెగటివ్ ఎక్స్‌ట్రాక్షన్ కంట్రోల్స్‌ను చేర్చండి.

వినియోగదారులకు ప్రవర్తనా నియమాలపై అవగాహన ఉండేలా ప్రతి ప్రాంతంలో స్పష్టమైన సూచనలను ప్రదర్శించాలని సిఫార్సు చేయబడింది. క్లినికల్ నమూనాలలో చాలా తక్కువ స్థాయిలో DNA లేదా RNAను గుర్తించే డయాగ్నస్టిక్ ల్యాబ్‌లు, ప్రీ-PCR గదులలో కొద్దిగా పాజిటివ్ ఎయిర్ ప్రెజర్‌తో మరియు పోస్ట్-PCR గదులలో కొద్దిగా నెగటివ్ ఎయిర్ ప్రెజర్‌తో వేర్వేరు ఎయిర్ హ్యాండ్లింగ్ సిస్టమ్‌లను కలిగి ఉండే అదనపు భద్రతా చర్యను అవలంబించవచ్చు.

చివరగా, నాణ్యత హామీ (QA) ప్రణాళికను రూపొందించడం సహాయకరంగా ఉంటుంది. అటువంటి ప్రణాళికలో రీఏజెంట్ మాస్టర్ స్టాక్‌లు మరియు వర్కింగ్ స్టాక్‌ల జాబితాలు, కిట్‌లు మరియు రీఏజెంట్‌లను నిల్వ చేయడానికి నియమాలు, నియంత్రణ ఫలితాల నివేదన, సిబ్బంది శిక్షణా కార్యక్రమాలు, సమస్య పరిష్కార అల్గారిథమ్‌లు మరియు అవసరమైనప్పుడు నివారణ చర్యలు వంటివి చేర్చాలి.

6. గ్రంథ పట్టిక

అస్లాన్ ఎ, కింజెల్మాన్ జె, డ్రీలిన్ ఇ, అనన్'యేవా టి, లావెండర్ జె. అధ్యాయం 3: క్యూపిసిఆర్ ప్రయోగశాలను ఏర్పాటు చేయడం. యూఎస్‌ఈపీఏ క్యూపిసిఆర్ పద్ధతి 1611 ఉపయోగించి వినోద జలాలను పరీక్షించడానికి ఒక మార్గదర్శక పత్రం. లాన్సింగ్- మిచిగాన్ స్టేట్ యూనివర్సిటీ.

పబ్లిక్ హెల్త్ ఇంగ్లాండ్, NHS. సూక్ష్మజీవశాస్త్ర పరిశోధనల కోసం UK ప్రమాణాలు: మాలిక్యులర్ యాంప్లిఫికేషన్ అస్సేస్ నిర్వహిస్తున్నప్పుడు మంచి ప్రయోగశాల పద్ధతి). క్వాలిటీ గైడెన్స్. 2013;4(4):1–15.

మిఫ్లిన్ టి. PCR ప్రయోగశాలను ఏర్పాటు చేయడం. కోల్డ్ స్ప్రింగ్ హార్బ్ ప్రోటోకాల్స్. 2007;7.

ష్రోడర్ ఎస్ 2013. సెంట్రిఫ్యూజ్‌ల సాధారణ నిర్వహణ: సెంట్రిఫ్యూజ్‌లు, రోటర్లు మరియు అడాప్టర్‌ల శుభ్రపరచడం, నిర్వహణ మరియు క్రిమిసంహారం (వైట్ పేపర్ నెం. 14). హాంబర్గ్: ఎప్పెన్‌డార్ఫ్; 2013.

వియానా ఆర్.వి., వాలిస్ సి.ఎల్. డయాగ్నస్టిక్ ప్రయోగశాలలలో ఉపయోగించే మాలిక్యులర్ ఆధారిత పరీక్షల కోసం గుడ్ క్లినికల్ లాబొరేటరీ ప్రాక్టీస్ (GCLP), ఇన్: అక్యార్ ఐ, ఎడిటర్. వైడ్ స్పెక్ట్రమ్స్ ఆఫ్ క్వాలిటీ కంట్రోల్. రిజెకా, క్రొయేషియా: ఇన్‌టెక్; 2011: 29–52.