மூலக்கூறு சோதனைக்கு செய்ய வேண்டியவை மற்றும் செய்யக்கூடாதவை

மூலக்கூறு கண்டறிதல் முறைகள், மாதிரிகளில் காணப்படும் சுவடு அளவுகளைப் பெருக்குவதன் மூலம் அதிக அளவு நியூக்ளிக் அமிலத்தை உற்பத்தி செய்யும் திறனைக் கொண்டுள்ளன. உணர்திறன் கண்டறிதலை செயல்படுத்துவதற்கு இது நன்மை பயக்கும் அதே வேளையில், ஆய்வக சூழலில் பெருக்க ஏரோசோல்களின் பரவல் மூலம் மாசுபடுவதற்கான சாத்தியக்கூறுகளையும் இது அறிமுகப்படுத்துகிறது. சோதனைகளை நடத்தும்போது, ​​வினைப்பொருட்கள், ஆய்வக உபகரணங்கள் மற்றும் பெஞ்ச் இடம் மாசுபடுவதைத் தவிர்க்க நடவடிக்கைகள் எடுக்கப்படலாம், ஏனெனில் அத்தகைய மாசுபாடு தவறான-நேர்மறை (அல்லது தவறான-எதிர்மறை) முடிவுகளை உருவாக்கக்கூடும்.

மாசுபடுவதற்கான வாய்ப்பைக் குறைக்க, எல்லா நேரங்களிலும் நல்ல ஆய்வகப் பயிற்சிகளைப் பின்பற்ற வேண்டும். குறிப்பாக, பின்வரும் புள்ளிகள் குறித்து முன்னெச்சரிக்கைகள் எடுக்கப்பட வேண்டும்:

1. வினைப்பொருட்களைக் கையாளுதல்
2. பணியிடம் மற்றும் உபகரணங்களின் அமைப்பு
3. நியமிக்கப்பட்ட மூலக்கூறு இடத்திற்கான பயன்பாடு மற்றும் சுத்தம் செய்தல் ஆலோசனை
4. பொதுவான மூலக்கூறு உயிரியல் ஆலோசனை
5. உள் கட்டுப்பாடுகள்
6. நூல் பட்டியல்

1. வினைப்பொருட்களைக் கையாளுதல்

ஏரோசோல்கள் உருவாவதைத் தவிர்க்க திறப்பதற்கு முன் மையவிலக்கு வினையாக்கி குழாய்களை சுருக்கமாகச் சுருக்கவும். பலமுறை உறைதல்-உருகுதல் மற்றும் மாஸ்டர் பங்குகள் மாசுபடுவதைத் தவிர்க்க அலிகோட் வினையாக்கிகள். அனைத்து வினையாக்கி மற்றும் வினையாக்கி குழாய்களையும் தெளிவாக லேபிளிட்டு தேதியிடவும், மேலும் அனைத்து சோதனைகளிலும் பயன்படுத்தப்படும் வினையாக்கி லாட் மற்றும் தொகுதி எண்களின் பதிவுகளைப் பராமரிக்கவும். வடிகட்டி குறிப்புகளைப் பயன்படுத்தி அனைத்து வினையாக்கிகள் மற்றும் மாதிரிகளையும் பைப்பெட் செய்யவும். வாங்குவதற்கு முன், வடிகட்டி குறிப்புகள் பயன்படுத்தப்படும் பைப்பெட்டின் பிராண்டிற்கு பொருந்துமா என்பதை உற்பத்தியாளருடன் உறுதிப்படுத்துவது நல்லது.

2. பணியிடம் மற்றும் உபகரணங்களின் அமைப்பு

சுத்தமான பகுதிகளிலிருந்து (PCR-க்கு முந்தையது) அழுக்கு பகுதிகளுக்கு (PCR-க்குப் பிந்தையது) வேலையின் ஓட்டம் ஒரு திசையில் நிகழும் வகையில் பணியிடம் ஒழுங்கமைக்கப்பட வேண்டும். பின்வரும் பொதுவான முன்னெச்சரிக்கைகள் மாசுபடுவதற்கான வாய்ப்பைக் குறைக்க உதவும். தனித்தனி அறைகள் அல்லது குறைந்தபட்சம் உடல் ரீதியாக தனித்தனி பகுதிகள் இருக்க வேண்டும்: மாஸ்டர்மிக்ஸ் தயாரிப்பு, நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட் சேர்த்தல், பெருக்கப்பட்ட தயாரிப்பின் பெருக்கம் மற்றும் கையாளுதல் மற்றும் தயாரிப்பு பகுப்பாய்வு, எ.கா. ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ்.

சில அமைப்புகளில், 4 தனித்தனி அறைகள் இருப்பது கடினம். சாத்தியமான ஆனால் விரும்பத்தக்கது அல்ல, மாஸ்டர்மிக்ஸ் தயாரிப்பை ஒரு கட்டுப்பாட்டுப் பகுதியில் செய்வது. எ.கா. லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட். உள்ளமைக்கப்பட்ட PCR பெருக்கத்தின் விஷயத்தில், இரண்டாவது சுற்று எதிர்வினைக்கான மாஸ்டர்மிக்ஸ் தயாரிப்பை மாஸ்டர்மிக்ஸ் தயாரிப்பிற்காக 'சுத்தமான' பகுதியில் தயாரிக்க வேண்டும், ஆனால் முதன்மை PCR தயாரிப்புடன் தடுப்பூசி பெருக்க அறையில் செய்யப்பட வேண்டும், முடிந்தால் ஒரு பிரத்யேக கட்டுப்பாட்டுப் பகுதியில் (எ.கா. லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்) செய்யப்பட வேண்டும்.

ஒவ்வொரு அறை/பகுதிக்கும் தெளிவாக பெயரிடப்பட்ட பைப்பெட்டுகள், வடிகட்டி முனைகள், குழாய் ரேக்குகள், சுழல்கள், மையவிலக்குகள் (பொருத்தமானால்), பேனாக்கள், பொதுவான ஆய்வக வினையாக்கிகள், ஆய்வக கோட்டுகள் மற்றும் கையுறைகளின் பெட்டிகள் ஆகியவை தனித்தனியே தேவைப்படுகின்றன, அவை அந்தந்த பணிநிலையங்களில் இருக்கும். நியமிக்கப்பட்ட பகுதிகளுக்கு இடையில் நகரும்போது கைகளைக் கழுவ வேண்டும் மற்றும் கையுறைகள் மற்றும் ஆய்வக கோட்டுகளை மாற்ற வேண்டும். வினையாக்கிகள் மற்றும் உபகரணங்களை ஒரு அழுக்குப் பகுதியிலிருந்து ஒரு சுத்தமான பகுதிக்கு நகர்த்தக்கூடாது. ஒரு வினையாக்கி அல்லது உபகரணத்தின் பகுதியை பின்னோக்கி நகர்த்த வேண்டிய ஒரு தீவிர நிகழ்வு ஏற்பட்டால், அதை முதலில் 10% சோடியம் ஹைபோகுளோரைட்டால் கிருமி நீக்கம் செய்ய வேண்டும், பின்னர் மலட்டு நீரில் துடைக்க வேண்டும்.

குறிப்பு

10% சோடியம் ஹைபோகுளோரைட் கரைசலை தினமும் புதிதாக தயாரிக்க வேண்டும். கிருமி நீக்கம் செய்யப் பயன்படுத்தும்போது, ​​குறைந்தபட்சம் 10 நிமிடங்கள் தொடர்பு கொள்ள வேண்டும்.
மாற்றாக, உள்ளூர் பாதுகாப்பு பரிந்துரைகள் சோடியம் ஹைபோகுளோரைட்டைப் பயன்படுத்த அனுமதிக்கவில்லை என்றால் அல்லது உபகரணங்களின் உலோகப் பாகங்களை மாசுபடுத்துவதற்கு சோடியம் ஹைபோகுளோரைட் பொருத்தமானதாக இல்லாவிட்டால், டிஎன்ஏ-அழிக்கும் மேற்பரப்பு கிருமி நீக்கம் செய்யும் பொருட்களாக சரிபார்க்கப்பட்ட வணிக ரீதியாகக் கிடைக்கும் தயாரிப்புகளைப் பயன்படுத்தலாம்.

வெறுமனே, ஊழியர்கள் ஒரே திசையில் பணி ஓட்ட நெறிமுறைகளைக் கடைப்பிடிக்க வேண்டும், மேலும் அழுக்குப் பகுதிகளிலிருந்து (PCR-க்குப் பிறகு) அதே நாளில் சுத்தமான பகுதிகளுக்கு (PCR-க்கு முந்தைய) திரும்பச் செல்லக்கூடாது. இருப்பினும், இது தவிர்க்க முடியாத சந்தர்ப்பங்கள் இருக்கலாம். அத்தகைய சந்தர்ப்பம் ஏற்படும் போது, ​​பணியாளர்கள் கைகளை நன்கு கழுவவும், கையுறைகளை மாற்றவும், நியமிக்கப்பட்ட ஆய்வக கோட்டைப் பயன்படுத்தவும், ஆய்வக புத்தகங்கள் போன்ற அறையிலிருந்து மீண்டும் எடுத்துச் செல்ல விரும்பும் எந்த உபகரணங்களையும் அறிமுகப்படுத்தாமல் இருக்கவும் கவனமாக இருக்க வேண்டும். மூலக்கூறு முறைகள் குறித்த பணியாளர் பயிற்சியில் இத்தகைய கட்டுப்பாட்டு நடவடிக்கைகள் வலியுறுத்தப்பட வேண்டும்.

பயன்பாட்டிற்குப் பிறகு, பெஞ்ச் இடங்களை 10% சோடியம் ஹைபோகுளோரைட் (அதைத் தொடர்ந்து மீதமுள்ள ப்ளீச்சை அகற்ற மலட்டு நீர்), 70% எத்தனால் அல்லது வணிக ரீதியாக கிடைக்கக்கூடிய டிஎன்ஏ-அழிக்கும் கிருமி நீக்கம் செய்யும் பொருளைக் கொண்டு சுத்தம் செய்ய வேண்டும். கதிர்வீச்சு மூலம் மாசுபாட்டை நீக்குவதற்கு, புற ஊதா (UV) விளக்குகள் பொருத்தப்பட வேண்டும். இருப்பினும், ஆய்வக ஊழியர்களின் புற ஊதா வெளிப்பாட்டைக் கட்டுப்படுத்த, UV விளக்குகளின் பயன்பாடு மூடிய வேலைப் பகுதிகளுக்கு, எ.கா. பாதுகாப்பு அலமாரிகளுக்கு மட்டுமே இருக்க வேண்டும். விளக்குகள் பயனுள்ளதாக இருப்பதை உறுதிசெய்ய, UV விளக்கு பராமரிப்பு, காற்றோட்டம் மற்றும் சுத்தம் செய்வதற்கான உற்பத்தியாளர் வழிமுறைகளைப் பின்பற்றவும்.

சோடியம் ஹைபோகுளோரைட்டுக்குப் பதிலாக 70% எத்தனால் பயன்படுத்தினால், கிருமி நீக்கத்தை முடிக்க UV ஒளியுடன் கதிர்வீச்சு தேவைப்படும்.
சோடியம் ஹைபோகுளோரைட்டைக் கொண்டு வோர்டெக்ஸ் மற்றும் சென்ட்ரிஃபியூஜை சுத்தம் செய்யாதீர்கள்; அதற்கு பதிலாக, 70% எத்தனால் கொண்டு துடைத்து UV ஒளியில் வெளிப்படுத்தவும், அல்லது வணிக ரீதியான DNA-அழிக்கும் கிருமிநாசினியைப் பயன்படுத்தவும். கசிவுகளுக்கு, மேலும் சுத்தம் செய்யும் ஆலோசனைக்கு உற்பத்தியாளரிடம் சரிபார்க்கவும். உற்பத்தியாளர் அறிவுறுத்தல்கள் அனுமதித்தால், பைப்பெட்டுகள் வழக்கமாக ஆட்டோகிளேவ் மூலம் கிருமி நீக்கம் செய்யப்பட வேண்டும். பைப்பெட்டுகளை ஆட்டோகிளேவ் செய்ய முடியாவிட்டால், அவற்றை 10% சோடியம் ஹைபோகுளோரைட் (அதைத் தொடர்ந்து மலட்டு நீரில் நன்கு துடைக்கவும்) அல்லது UV வெளிப்பாட்டிற்குப் பிறகு வணிக ரீதியான DNA-அழிக்கும் கிருமிநாசினியைப் பயன்படுத்தி சுத்தம் செய்தால் போதுமானது.

அதிக சதவீத சோடியம் ஹைபோகுளோரைட்டைக் கொண்டு சுத்தம் செய்வது, தொடர்ந்து செய்தால், இறுதியில் பைப்பெட் பிளாஸ்டிக் மற்றும் உலோகங்களை சேதப்படுத்தக்கூடும்; முதலில் உற்பத்தியாளரின் பரிந்துரைகளைச் சரிபார்க்கவும். உற்பத்தியாளர் பரிந்துரைத்த அட்டவணையின்படி அனைத்து உபகரணங்களும் தொடர்ந்து அளவீடு செய்யப்பட வேண்டும். அளவுத்திருத்த அட்டவணை கடைபிடிக்கப்படுவதையும், விரிவான பதிவுகள் பராமரிக்கப்படுவதையும், சேவை லேபிள்கள் உபகரணங்களில் தெளிவாகக் காட்டப்படுவதையும் உறுதி செய்வதற்கு நியமிக்கப்பட்ட நபர் பொறுப்பேற்க வேண்டும்.

3. நியமிக்கப்பட்ட மூலக்கூறு இடத்திற்கான பயன்பாடு மற்றும் சுத்தம் செய்தல் ஆலோசனை

முன்-PCR: ரீஜென்ட் அலிகோட்டிங் / மாஸ்டர்மிக்ஸ் தயாரிப்பு: மூலக்கூறு பரிசோதனைகளைத் தயாரிப்பதற்குப் பயன்படுத்தப்படும் அனைத்து இடங்களிலும் இது மிகவும் தூய்மையானதாக இருக்க வேண்டும் மற்றும் UV ஒளியுடன் பொருத்தப்பட்ட நியமிக்கப்பட்ட லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்டாக இருக்க வேண்டும். மாதிரிகள், பிரித்தெடுக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலம் மற்றும் பெருக்கப்பட்ட PCR தயாரிப்புகள் இந்த பகுதியில் கையாளப்படக்கூடாது. பெருக்க ரியாஜெண்டுகளை அதே நியமிக்கப்பட்ட இடத்தில் ஒரு ஃப்ரீசரில் (அல்லது குளிர்சாதன பெட்டியில், உற்பத்தியாளர் பரிந்துரைகளின்படி) வைக்க வேண்டும், லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட் அல்லது முன்-PCR பகுதிக்கு அடுத்ததாக வைக்க வேண்டும். PCR-க்கு முந்தைய பகுதி அல்லது லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்டில் நுழையும் ஒவ்வொரு முறையும் கையுறைகளை மாற்ற வேண்டும்.

PCR-க்கு முந்தைய பகுதி அல்லது லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்டைப் பயன்படுத்துவதற்கு முன்னும் பின்னும் பின்வருமாறு சுத்தம் செய்ய வேண்டும்: கேபினட்டில் உள்ள அனைத்து பொருட்களையும், எ.கா. பைப்பெட்டுகள், டிப் பாக்ஸ்கள், வோர்டெக்ஸ், சென்ட்ரிஃபியூஜ், டியூப் ரேக்குகள், பேனாக்கள் போன்றவற்றை 70% எத்தனால் அல்லது வணிக ரீதியான டிஎன்ஏ-அழிக்கும் கிருமிநாசினியால் துடைத்து, உலர விடவும். மூடிய வேலைப் பகுதியின் விஷயத்தில், எ.கா. லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்டில், ஹூட்டை 30 நிமிடங்கள் UV ஒளியில் வெளிப்படுத்தவும்.

குறிப்பு

வினையாக்கிகளை UV ஒளியில் வெளிப்படுத்த வேண்டாம்; அது சுத்தமாகிவிட்ட பிறகு மட்டுமே அவற்றை கேபினட்டிற்குள் நகர்த்தவும். ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் PCR-ஐச் செய்தால், RNases-ஐ தொடர்பு கொள்ளும்போது உடைக்கும் ஒரு கரைசலைக் கொண்டு மேற்பரப்புகள் மற்றும் உபகரணங்களைத் துடைப்பதும் உதவியாக இருக்கும். இது RNA-வின் நொதிச் சிதைவிலிருந்து தவறான-எதிர்மறையான முடிவுகளைத் தவிர்க்க உதவும். கிருமி நீக்கம் செய்த பிறகு மற்றும் மாஸ்டர்மிக்ஸைத் தயாரிப்பதற்கு முன், கையுறைகளை மீண்டும் ஒருமுறை மாற்ற வேண்டும், பின்னர் கேபினட் பயன்படுத்தத் தயாராக இருக்கும்.

முன்-PCR: நியூக்ளிக் அமில பிரித்தெடுத்தல்/வார்ப்புரு சேர்த்தல்:

நியூக்ளிக் அமிலத்தைப் பிரித்தெடுத்து, தனித்தனி பைப்பெட்டுகள், வடிகட்டி முனைகள், குழாய் ரேக்குகள், புதிய கையுறைகள், ஆய்வக பூச்சுகள் மற்றும் பிற உபகரணங்களைப் பயன்படுத்தி இரண்டாவது நியமிக்கப்பட்ட பகுதியில் கையாள வேண்டும். இந்தப் பகுதி, மாஸ்டர்மிக்ஸ் குழாய்கள் அல்லது தட்டுகளில் டெம்ப்ளேட், கட்டுப்பாடுகள் மற்றும் போக்குக் கோடுகளைச் சேர்ப்பதற்கும் ஆகும். பகுப்பாய்வு செய்யப்படும் பிரித்தெடுக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமில மாதிரிகள் மாசுபடுவதைத் தவிர்க்க, நேர்மறை கட்டுப்பாடுகள் அல்லது தரநிலைகளைக் கையாளுவதற்கு முன்பு கையுறைகளை மாற்றவும், தனித்தனி பைப்பெட்டுகளைப் பயன்படுத்தவும் பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. PCR ரியாஜெண்டுகள் மற்றும் பெருக்கப்பட்ட தயாரிப்புகள் இந்தப் பகுதியில் பைப்பெட் செய்யப்படக்கூடாது. மாதிரிகள் அதே பகுதியில் நியமிக்கப்பட்ட குளிர்சாதன பெட்டிகள் அல்லது உறைவிப்பான்களில் சேமிக்கப்பட வேண்டும். மாதிரி பணியிடத்தை மாஸ்டர்மிக்ஸ் இடத்தைப் போலவே சுத்தம் செய்ய வேண்டும்.

PCR-க்குப் பிந்தையது: பெருக்கப்பட்ட தயாரிப்பின் பெருக்கம் மற்றும் கையாளுதல்.

இந்த நியமிக்கப்பட்ட இடம் பிந்தைய பெருக்க செயல்முறைகளுக்கானது மற்றும் PCR-க்கு முந்தைய பகுதிகளிலிருந்து உடல் ரீதியாக தனித்தனியாக இருக்க வேண்டும். இது பொதுவாக தெர்மோசைக்லர்கள் மற்றும் நிகழ்நேர தளங்களைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் உள்ளமைக்கப்பட்ட PCR செய்யப்படுகிறதென்றால், சுற்று 1 PCR தயாரிப்பை சுற்று 2 எதிர்வினையில் சேர்ப்பதற்கான லேமினார் ஃப்ளோ கேபினட்டைக் கொண்டிருக்க வேண்டும். மாசுபாட்டின் ஆபத்து அதிகமாக இருப்பதால், PCR ரியாஜெண்டுகள் மற்றும் பிரித்தெடுக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலத்தை இந்தப் பகுதியில் கையாளக்கூடாது. இந்தப் பகுதியில் கையுறைகள், ஆய்வக பூச்சுகள், தட்டு மற்றும் குழாய் ரேக்குகள், பைப்பெட்டுகள், வடிகட்டி குறிப்புகள், தொட்டிகள் மற்றும் பிற உபகரணங்கள் தனித்தனி தொகுப்பைக் கொண்டிருக்க வேண்டும். குழாய்களைத் திறப்பதற்கு முன் மையவிலக்கு செய்யப்பட வேண்டும். மாதிரி பணியிடத்தை மாஸ்டர்மிக்ஸ் இடத்தைப் போலவே சுத்தம் செய்ய வேண்டும்.

PCR-க்குப் பிந்தைய: தயாரிப்பு பகுப்பாய்வு

இந்த அறை ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் தொட்டிகள், பவர் பேக்குகள், UV டிரான்சில்லுமினேட்டர் மற்றும் ஜெல் ஆவணமாக்கல் அமைப்பு போன்ற தயாரிப்பு கண்டறிதல் உபகரணங்களுக்கானது. இந்தப் பகுதியில் தனித்தனி கையுறைகள், ஆய்வக பூச்சுகள், தட்டு மற்றும் குழாய் ரேக்குகள், பைப்பெட்டுகள், வடிகட்டி முனைகள், தொட்டிகள் மற்றும் பிற உபகரணங்கள் இருக்க வேண்டும். ஏற்றுதல் சாயம், மூலக்கூறு மார்க்கர் மற்றும் அகரோஸ் ஜெல் மற்றும் இடையக கூறுகளைத் தவிர வேறு எந்த வினையாக்கிகளையும் இந்தப் பகுதிக்குள் கொண்டு வர முடியாது. மாதிரி பணியிடத்தை மாஸ்டர்மிக்ஸ் இடத்தைப் போலவே சுத்தம் செய்ய வேண்டும்.

முக்கியமான குறிப்பு

PCR-க்கு முந்தைய அறைகளில் ஏற்கனவே வேலை முடிந்திருந்தால், PCR-க்கு முந்தைய அறைகளுக்குள் ஒரே நாளில் நுழையக்கூடாது. இது முற்றிலும் தவிர்க்க முடியாததாக இருந்தால், கைகளை முதலில் நன்கு கழுவி, குறிப்பிட்ட ஆய்வக கோட்டுகள் அறைகளில் அணிந்திருப்பதை உறுதிசெய்து கொள்ளுங்கள். PCR-க்கு முந்தைய அறைகளில் ஆய்வக புத்தகங்கள் மற்றும் காகிதப்பணிகள் பயன்படுத்தப்பட்டிருந்தால் அவற்றை PCR-க்கு முந்தைய அறைகளுக்குள் எடுத்துச் செல்லக்கூடாது; தேவைப்பட்டால், நெறிமுறைகள்/மாதிரி ஐடிகள் போன்றவற்றின் நகல் அச்சுப் பிரதிகளை எடுத்துக் கொள்ளுங்கள்.

4. பொதுவான மூலக்கூறு உயிரியல் ஆலோசனை

மதிப்பீட்டுத் தடுப்பைத் தவிர்க்க தூள் இல்லாத கையுறைகளைப் பயன்படுத்தவும். மாசுபாட்டைக் குறைப்பதற்கு சரியான குழாய் பதிக்கும் நுட்பம் மிக முக்கியமானது. தவறான குழாய் பதித்தல் திரவங்களை விநியோகிக்கும்போது தெறிப்பதற்கும் ஏரோசோல்களை உருவாக்குவதற்கும் வழிவகுக்கும். சரியான குழாய் பதிப்பதற்கான நல்ல பயிற்சியை பின்வரும் இணைப்புகளில் காணலாம்: கில்சன் குழாய் பதிக்கும் வழிகாட்டி, அனகெம் குழாய் பதிக்கும் நுட்ப வீடியோக்கள், திறப்பதற்கு முன் மையவிலக்கு குழாய்கள், மற்றும் தெறிப்பதைத் தவிர்க்க அவற்றை கவனமாகத் திறக்கவும். மாசுபடுத்திகள் நுழைவதைத் தவிர்க்க பயன்பாட்டிற்குப் பிறகு உடனடியாக குழாய்களை மூடவும்.

பல வினைகளைச் செய்யும்போது, ​​வினைப்பொருள் பரிமாற்றங்களின் எண்ணிக்கையைக் குறைக்கவும் மாசுபாட்டின் அச்சுறுத்தலைக் குறைக்கவும் பொதுவான வினைப்பொருட்களைக் கொண்ட ஒரு மாஸ்டர்மிக்ஸை (எ.கா. நீர், dNTPகள், பஃபர், ப்ரைமர்கள் மற்றும் என்சைம்) தயார் செய்யவும். மாஸ்டர்மிக்ஸை பனி அல்லது குளிர் தொகுதியில் அமைக்க பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. ஹாட் ஸ்டார்ட் என்சைமைப் பயன்படுத்துவது குறிப்பிட்ட அல்லாத தயாரிப்புகளின் உற்பத்தியைக் குறைக்க உதவும். சிதைவைத் தவிர்க்க, ஃப்ளோரசன்ட் புரோப்களைக் கொண்ட வினைப்பொருட்களை ஒளியிலிருந்து பாதுகாக்கவும்.

5. உள் கட்டுப்பாடுகள்

நன்கு வகைப்படுத்தப்பட்ட, உறுதிப்படுத்தப்பட்ட நேர்மறை மற்றும் எதிர்மறை கட்டுப்பாடுகள், அனைத்து எதிர்வினைகளிலும் வார்ப்புரு இல்லாத கட்டுப்பாடு மற்றும் அளவு எதிர்வினைகளுக்கான பல-புள்ளி டைட்ரேட்டட் போக்குக் கோடு ஆகியவற்றைச் சேர்க்கவும். நேர்மறை கட்டுப்பாடு மாசுபடுத்தும் அபாயத்தை ஏற்படுத்தும் அளவுக்கு வலுவாக இருக்கக்கூடாது. நியூக்ளிக் அமில பிரித்தெடுத்தலைச் செய்யும்போது நேர்மறை மற்றும் எதிர்மறை பிரித்தெடுத்தல் கட்டுப்பாடுகளைச் சேர்க்கவும்.

பயனர்கள் நடத்தை விதிகளை அறிந்துகொள்ளும் வகையில், ஒவ்வொரு பகுதியிலும் தெளிவான வழிமுறைகளை இடுகையிட பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. மருத்துவ மாதிரிகளில் மிகக் குறைந்த அளவிலான டி.என்.ஏ அல்லது ஆர்.என்.ஏவைக் கண்டறியும் நோயறிதல் ஆய்வகங்கள், பி.சி.ஆர்-க்கு முந்தைய அறைகளில் சற்று நேர்மறை காற்று அழுத்தமும், பி.சி.ஆர்-க்குப் பிந்தைய அறைகளில் சற்று எதிர்மறை காற்று அழுத்தமும் கொண்ட தனி காற்று கையாளும் அமைப்புகளைக் கொண்டிருப்பதன் கூடுதல் பாதுகாப்பு நடவடிக்கையை ஏற்றுக்கொள்ள விரும்பலாம்.

இறுதியாக, ஒரு தர உத்தரவாத (QA) திட்டத்தை உருவாக்குவது உதவியாக இருக்கும். அத்தகைய திட்டத்தில் ரீஜென்ட் மாஸ்டர் ஸ்டாக்குகள் மற்றும் வேலை செய்யும் ஸ்டாக்குகளின் பட்டியல்கள், கருவிகள் மற்றும் ரியாஜென்ட்களை சேமிப்பதற்கான விதிகள், கட்டுப்பாட்டு முடிவுகளைப் புகாரளித்தல், பணியாளர் பயிற்சி திட்டங்கள், சரிசெய்தல் வழிமுறைகள் மற்றும் தேவைப்படும்போது தீர்வு நடவடிக்கைகள் ஆகியவை அடங்கும்.

6. நூல் பட்டியல்

அஸ்லான் ஏ, கின்செல்மேன் ஜே, ட்ரீலின் இ, அனன்'ஈவா டி, லாவண்டர் ஜே. அத்தியாயம் 3: ஒரு qPCR ஆய்வகத்தை அமைத்தல். USEPA qPCR முறையைப் பயன்படுத்தி பொழுதுபோக்கு நீரைச் சோதிப்பதற்கான வழிகாட்டுதல் ஆவணம் 1611. லான்சிங்- மிச்சிகன் மாநில பல்கலைக்கழகம்.

பொது சுகாதார இங்கிலாந்து, NHS. நுண்ணுயிரியல் விசாரணைகளுக்கான UK தரநிலைகள்: மூலக்கூறு பெருக்க மதிப்பீடுகளைச் செய்யும்போது நல்ல ஆய்வக நடைமுறை). தர வழிகாட்டுதல். 2013;4(4):1–15.

மிஃப்லின் டி. PCR ஆய்வகத்தை அமைத்தல். கோல்ட் ஸ்பிரிங் ஹார்ப் புரோட்டோக். 2007;7.

ஷ்ரோடர் எஸ் 2013. மையவிலக்குகளின் வழக்கமான பராமரிப்பு: மையவிலக்குகள், ரோட்டர்கள் மற்றும் அடாப்டர்களை சுத்தம் செய்தல், பராமரித்தல் மற்றும் கிருமி நீக்கம் செய்தல் (வெள்ளை அறிக்கை எண். 14). ஹாம்பர்க்: எப்பென்டார்ஃப்; 2013.

வியானா ஆர்.வி., வாலிஸ் சி.எல். கண்டறியும் ஆய்வகங்களில் பயன்படுத்தப்படும் மூலக்கூறு அடிப்படையிலான சோதனைகளுக்கான நல்ல மருத்துவ ஆய்வக பயிற்சி (ஜி.சி.எல்.பி), பிரிவில்: அக்யார் I, ஆசிரியர். தரக் கட்டுப்பாட்டின் பரந்த நிறமாலை. ரிஜேகா, குரோஷியா: இன்டெக்; 2011: 29–52.